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求脑内皮细胞bend3的培养经验
汤姆卜丽波
你查一下它的血清要求。有的细胞要用高糖,有的用1640有得用Mem都不一样
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CCK8
bamboopiggy
你做cck8的标曲作什么呢?判断细胞数?可以X轴细胞数,Y轴OD值,选择散点图,插入趋势线,然后选择公式,就可以得到y=ax+b,你知道了y的值,就可以得出x的值。
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A549细胞形态判断,用于TGF诱导EMT
Eason老歌迷
不太好,怎么感觉里面细胞老化挺多的呢?
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心肌细胞的形态对吗?
Eason老歌迷
细胞形态变了,可能是所用的培养液用的时间太久,里面的必须营养成分谷氨酰胺缺失------配制好的培养液在4度冰箱放置两周后,大部分谷氨酰胺就已破坏,在缺少谷氨酰胺时会出现细胞生长不良等现象。以前我养的细胞也出现过纤维化 变脏等现象,我换成新鲜培养基后它就变好了。也可能是PH值不合适。比如原来生长条件是一个PH,现在改变较大。还有可能是传代时细胞密度太小.有些细胞在相互接触状态下长得比较好。
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问
PAS染色求助
Eason老歌迷
感觉是你的染色不均匀导致的,因为正常应该都会有的。
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求助求助
balalaLy
我们课题组之前做衰老课题也是体内体外结果不一致,逻辑上说得通就行
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滑膜成纤维细胞培养1w+视野里是啥
Eason老歌迷
可能是胶原纤维。半月板损伤后滑膜细胞,成纤维细胞,间充质细胞,沿裂隙边缘充填,以肉芽组织形式修复,在一定生物应力作用下变成致密原结缔组织,部分成纤维细胞转化成软骨细胞,细胞合成分泌胶原蛋白,糖蛋白类复合物,形成胶原纤维和基质。
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细胞凋亡
汤姆卜丽波
你做预实验嘛,用Cck8做个浓度梯度,然后大致估算最适浓度,最后流式细胞看凋亡
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脂肪酸诱导HepG2细胞脂肪变性
Eason老歌迷
是的,它是外源添加,并不是改变基因层次。
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康宁基质胶稀释问题
dxy_hmql67l0
我们做Transwell是用1:8稀释
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想请问一下大佬们关于CCD-18co的培养方法
汤姆卜丽波
这样,你可以试着增大血清比例或者用F12试一下
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小鼠骨髓内皮祖细胞培养纯度不高
Eason老歌迷
周围的杂细胞还存在,可能是消化时间不够引起的。每种细胞消化时间都不一样,得自己摸索条件。加入胰酶后,注意观察细胞,在细胞开始收缩的适当时间里就得及时终止,否则对细胞损伤很大。也不能太短,太短还没有消化完全,会容易导致细胞老化,生长不好。
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问
真核生物表达,验证质粒连接目的基因问题
Eason老歌迷
你用的是哪一种毕赤酵母菌株。毕赤酵母宿主菌常用的菌株类型有四种,分别是X33、 GS115 、 KM71H 、 SMD116。GS115 菌株具有 AOX1 基因,属于 Mut+ ,指的是甲醇利用正常型; KM71 H 菌株的 AOX1 位点被 ARG4 基因插入,属于 Muts ,指甲醇利用缓慢型,两种菌株都适用于一般的酵母转化方法 。不同的菌株验证方法也不一样。
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用流式分选目的细胞,打小鼠尾静脉,做动物实验,可行吗。
bamboopiggy
可以啊,但是你要做好预实验,确定流式分选能得到足够的细胞。
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问
LPS诱导细胞炎症cck8实验
Dfcaizjm
我都进行24h饥饿处理,结果还是这样
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细胞,动物组织蛋白前处理有反复冻融提蛋白,以及蛋白裂解液提蛋白,这两种怎么选择?
周周susan
请问反复冻融法大概液氮和室温多久呢?
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问
蛋白酶 k的单位换算
Eason老歌迷
你是不是理解错了。U是酶活单位,意思为在一般情况下,1分钟内转化1微摩尔底物所需的酶量为1U,即1 U=1 微摩/分钟,试剂包装上应该有相应质量,即该质量药品所具有的酶活。例如10 mg的蛋白酶标注为25000 U,就代表每毫克蛋白酶具有2500 U的酶活,即每毫克蛋白酶每分钟可以催化2500 微摩蛋白。
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细胞检测TC,TG
Eason老歌迷
可以用移液枪轻轻吹打,然后充分使细胞和裂解液接触。
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293t细胞求助!
Eason老歌迷
有点像是真菌感染,也可能是你没有吹散的细胞团。
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想问一下细胞染什么菌了
Eason老歌迷
感觉像是真菌感染。先用肉眼观察,把培养瓶或培养皿拿起来,对着光线检查。在低倍镜下,真菌的菌丝体成长棒状,并横穿整个视野,还可以观察到酵母,有时呈小圆球形,有时还有芽。
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