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科研学霸天团，48小时有问必答

问hepg2细胞堆叠长了形貌发生了好大变化，这是细胞老化了吗？

hy-cell

保证培养基不干的情况下尽可能不动它，让它缓缓，长密点看看状态会不会恢复吧

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问求求大神看看这是细胞污染吗？！

Dr_劉医生

片状物不是污染，背景很干净，不是污染；而且能用PBS冲洗掉，说明可能是死亡细胞

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问293T这个细胞形态正常吗

申东熙老伯

正常，细胞密度问题，第一张是传代的时候没把细胞摇匀。

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问LC3B的电泳条件是什么才能跑出漂亮的条带呢？

土井挞克树

LC3分子量比较小，只有16KD，在电泳的时候需要使用12%-15%的胶，避免跑过。转膜的时候需要使用0.22um的膜，缩短转膜的时间，40min即可。切莫使用0.45um的膜，否则量相对少的LC3I更不容易显出来。

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问培养基中的酵母提取物灭菌问题

申东熙老伯

一次不要配太多，用孔径小的滤膜在超净台过滤除菌。

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问神经干细胞自发分化

土井挞克树

不正常，正常不会有这么多死细胞。

1 回答689 围观

问CHIP超声！细胞一半超过了，一半完全没超开

土井挞克树

细胞密度过高，超声就可能超不过气，建议调整细胞密度。

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问msc细胞这样拉丝？爆炸？是什么状况啊

土井挞克树

可能是你接种密度太低。无血清培养基必须高密度接种，接种密度过低，会导致细胞长不起来，呈现拉丝状

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问求助,HepG2细胞长得好慢

juyue2010

铺细胞不能太稀，会导致细胞生长缓慢，铺的数量一致，做到可控。

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问肾脏HE

土井挞克树

一般来说冠状面看到的解剖清晰。

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问请问Hippo信号通路中的active YAP 、YAP、P-YAP之间的区别，急求，感谢各位

土井挞克树

这些都是Hippo信号通路中的不同的调控通路，像YAP就是磷酸化后进入胞浆的调控。

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问mTOR磷酸化位点有很多，怎么选择呢？

土井挞克树

根据自己的实验需求，做筛选试验。

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问Trizol提取RNA，加氯仿离心后没有分三层，为什么啊？

juyue2010

与你的离心机转子角度有关，你吸取上层水相就好

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问LC3用15％的胶，还是分不开是怎么回事，是电泳时间太短吗？

土井挞克树

有可能是缓冲液的问题，延长电泳时间

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问FUNDC1线粒体自噬 p62

balalaLy

文献中没有找到不代表就没有，你的实验做出来了只要符合逻辑，说得通，反而是好事。

2 回答403 围观

问求问细胞he染色操作步骤

土井挞克树

内皮细胞HE染色步骤：1、脱蜡，脱蜡二甲苯Ⅰ、Ⅱ各10分钟，事先准备好盖玻片。2、覆水，100%（Ⅰ、Ⅱ）、90%、80%、70%酒精各5分钟，自来水冲洗5分钟×3。3.、苏木精染色5分钟，根据染色情况，可以适当增加或减少染色时间，流水冲洗。4、5%乙酸分化1分钟，流水冲洗，用吸管滴加乙酸，布满玻片上的组织即可，分化后颜色变浅了一些，成为蓝色。5、返蓝：返蓝液，实验室没有，也可不用。6、伊红染色1

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问bv-2培养

土井挞克树

这个细胞有时候会自激活，这个要注意。

1 回答469 围观

问请问这是细胞污染了吗

土井挞克树

看镜下影像是污染了，需要清理培养基

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问细胞污染

balalaLy

是真菌吧，用过的培养基可能也要排除一下，耗材得重新高压灭菌

4 回答327 围观

问SP2/0细胞培养

土井挞克树

最低也要达到百分之七十，这个密度差不多

1 回答446 围观

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