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问
为什么提出来的4管的rna浓度会差这么多,只有1号管能跑出条带,2号很浅,3和4都没有条带。(都是在一个研钵里面的)
Dr_劉医生
提取RNA的手法问题,RNA发生了降解,就会导致只有一个深条带,然后逐渐变浅甚至没有
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问
对转染shRNA的细胞进行消化传代,会影响转染效果吗?
balalaLy
你是做瞬转的吧,最简单的是你用6cm盘做转染,24小时后消化铺两个12孔板,一个做划痕一个做pcr验证转染效率。
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问
Lo2细胞如图不成形态是什么问题呀?
dxy_v9tqo3i7
排除污染的话,可以尝试高浓度血清培养再逐步降低
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问
有同学用过人髓核永生化细胞做过实验吗?跟原代的人髓核细胞相比有区别吗?
土井挞克树
原代髓核细胞比较稳定,一般不用髓核永生化细胞。
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问
大家用THP-1细胞做实验一般都在第几代内
土井挞克树
我一般是第五六代左右开始做实验。
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问
用24孔板做siRNA转染,提的rna非常少,能不能把两个复孔的细胞放在一起提取
土井挞克树
提取的rna少可以加大上样量,复孔板混合容易造成污染。
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问
b16-F10黑色素瘤细胞和3LL小鼠肺癌细胞一块培养,离心后都出现黑色细胞沉淀,请问3LL正常情况下会出现黑色的细胞沉淀吗?
土井挞克树
3LL细胞正常不会有黑色素沉淀,大概率被污染。
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问
怎么样才能去敲除尽量多的 TP53 蛋白
土井挞克树
可以先用特异性核酸酶剪切一下再敲除。
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问
UP.sight单细胞克隆效率是多少?
Dr_劉医生
单独用UP.SIGHT分离单克隆生长效率可达84%左右,联合用3D全孔成像可达99%
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问
cck8实验肉眼都能看见每孔很明显变黄了,为啥酶标仪检测有的孔是负数,有的就算是正的也只有零点零几
蜡笔小迟
酶标仪的滤片有没有问题,波长选的是450嘛?
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问
脂肪面积
dxyc42u
magej中数据分割,测出来体积,然后测得材料重量,是不是密度就出来了。如果ImageJ用的费劲,可以试试Avizo,Amira,Mimics,VG等专业的三维图形图像处理软件。
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问
样本量计算
dxyc42u
人样本一般至少30,动物一般至少10个.
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问
心脏免疫荧光染色
土井挞克树
你试一下漂染,然后用pbs多清洗几遍。
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问
目的是Cytoc和AIF胞浆和线粒体内比值,动物组织也能提胞浆和线粒体蛋白吗?
dxyc42u
可以选择细胞分离提取跑wb,动物只做它们的组化
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问
可用于研究内质网应激的肺上皮细胞
dxyc42u
A549细胞是腺癌人类肺泡基底上皮细胞
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问
A549换成无糖培养基处理12小时会死吗?
土井挞克树
无糖12个小时太长了,一定会死的,建议时间都是6-8小时。
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问
细胞实验药物溶解度低但所需浓度较高怎么办?
汤姆卜丽波
你可以分别用乙醇和dmso溶解一下,做对照组看哪个好
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问
悬浮细胞用lip2000转染siRNA以后需要六小时换液吗
土井挞克树
需要的,如果不换液会影响转染成功率,导致细胞死亡
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问
用六孔板培养细胞,每次提的rna的非常少,转染后可以让细胞长的非常密再提吗
huarenqiang5
如果长到80%提的话肯定好些,但也可以用PBS洗掉培养基后,不用胰酶消化,直接在六孔板中加入trizol裂解。
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问
请问这些293t细胞咋长这样,那些大块的是培养基来的吗,我想知道这些细胞是不是都死了😭😭
Dr_劉医生
不是死亡,293t细胞本来就是上皮样细胞,贴壁生长,大块片状的物质就是上皮样的293t细胞,正常现象。
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