seahorse检测问题？
dxy_4f9x5ngr
我们使用seahorse检测分离的骨骼肌线粒体的OCR值过程中，加入fccp后线粒体的ocr没有上升。我们在第一次实验时采用5ug的骨骼肌线粒体，加入2um的oligo，和2um的fccp，线粒体的ocr值始不受fccp的影响如图一，
图一：5ug骨骼肌线粒体，2umoligo，2umfccp
在其他的组0um、0.5um、1.5um浓度的fccp中，没有观测到线粒体的ocr的变化，2umfccp某些孔ocr上升，但是不如基础值高。我们使用贴壁细胞成骨细胞作为对照组，并且加入1um的oligo和1um的fccp，加入fccp后没产生任何变化如图二。
图二：10000个成骨细胞，1umoligo，1umfccp
第二次实验过程中我们使用2.5ug的骨骼肌线粒体，加入2um的oligo和4um的fccp。oligo和fccp都没产生影响如图三。
图三:2.5ug骨骼肌线粒体，2umoligo，2umfccp
有没有大佬能为我们解答一下，为什么加入fccp之后线粒体的ocr值没有反应?
3 个回答
冰冷无情
您好，我也遇到了同样的问题，请问您最后解决了嘛
土井挞克树
考虑是药物浓度的影响，两次的药物浓度差会导致检测结果不一样
loveliufudan
以下是一些可能的解释：
药物浓度：您提到在第一次实验中使用了 5ug 的骨骼肌线粒体、2um 的 Oligo 和 2um 的 FCCP。在其他实验中使用了不同浓度的 FCCP。这些浓度的选择可能对结果产生影响。您可以尝试使用不同浓度的 FCCP 进行进一步的实验，以确定是否存在浓度依赖性的效应。
细胞类型：您提到在对照组中使用了贴壁细胞（成骨细胞），并加入了 1um 的 Oligo 和 1um 的 FCCP。如果您在骨骼肌线粒体的实验中使用的细胞类型和对照组中的细胞类型有差异，那么这些细胞类型之间的代谢特征和响应可能会不同。
实验条件：除了上述因素外，实验条件的差异也可能导致结果的变化。例如，温度、pH 值、缓冲液成分等因素都可能对线粒体的功能和反应产生影响。确保实验条件的一致性可以帮助您获得可靠的结果。
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