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        睾丸HE染色

        相关实验:小鼠睾丸活精子抑制观察实验

        user-title

        dxy_xvershdw

        图片描述

        做了做了c57小鼠he染色,睾丸组织裂成这样,想问问是什么问题。

        用4%多聚甲醛固定时间长了,还放在了—80℃冰箱,这个用的乙醇梯度脱水是70%-100%,脱水了30min。二甲苯3min,石蜡100min。但是组织破碎了。请教各位前辈,还有好的脱水方法吗。切片是5μm,新刀片。不知道问题出在哪里了。

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        2 个回答

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        组织破碎可能是由于样品在脱水、清洗或包埋过程中受到机械性创伤或化学物质影响造成的。以下是一些可能的问题和建议:

        多聚甲醛固定时间过长:固定时间过长可能导致交联度增加,使得细胞和组织变得更加脆弱易碎。建议固定时间缩短到适当的时间。

        乙醇梯度脱水过快:脱水过程中,乙醇的逐渐浓度变化有利于渐进性地去除水分。但是脱水时间过短可能导致组织内水分过多,脱水时间过长可能导致组织变得脆弱。建议根据组织类型和大小适当调整脱水时间。

        切片厚度过薄:如果切片过于薄,组织在包埋过程中可能受到更大的机械性创伤,导致破碎。建议增加切片厚度。

        切片过程中受到机械性创伤:在切片的过程中,如果刀片不够锋利或者角度不正确,可能导致组织受到机械性创伤,进而破碎。建议使用锋利的刀片,确保切片时刀片角度正确。

        石蜡包埋时间过长:石蜡包埋时间过长可能导致石蜡渗透到组织内部,使组织变得脆弱易碎。建议缩短石蜡包埋时间。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        脱水时间太长了所以脱水过度,减少脱水时间

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