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        流式测凋亡上机测试前的清洗,注意点是什么

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        斑点狗吃肉肉

        第一次做,希望解答的详细的

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        4 个回答

        user-title

        汤姆卜丽波

        有帮助

        用PBS洗2次,1000r/min离心5min,收集沉淀。休息要尽量弃净上清,可以用枪头吸出去,然后用4℃预冷的70%的冰乙醇1ml重悬,4℃过夜。

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        小李子KVH3

        有帮助

        流式样品的准备:DNA含量的测定:用本法可以测定细胞周期、细胞倍体和凋亡,在样品的制备中存在的问题主要是细胞的聚集和碎片,建议在固定细胞时加入3%小牛血清。1 培养或分离的细胞约110 6,离心沉淀后用0.3ml含10%小牛血清的PBS悬浮,移入1.5mlEP管中,加入0.7ml无水乙醇,置-20摄氏度下固定细胞24小时以上(用本法制定的细胞可以在-20摄氏度下保存一周甚至更长的时间)。2 3000rpm离心细胞30妙,吸弃上清,用1mlPBS重悬细胞,再离心洗涤细胞一次,吸弃上清,沉淀细胞用100ul 1mg/ml RNase A悬浮,37摄氏度30min,再加入400ul 50ug/ml PI,置暗处10min后上机检测。3 结果分析:流式报告中可给出G0/G1、S、G2/M各期细胞的百分比,凋亡百分比和细胞倍体

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        徐彩云6

        有帮助

        细胞沉淀用4℃预冷的70%的冰乙醇1ml重悬,4℃过夜。每个细胞样品细胞量需达到106(细胞沉淀要打散,避免细胞聚集),细胞量少可能测不出结果,或结果不太准确。

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        土井挞克树

        有帮助
        先跑一会儿DMSO,然后再用蒸馏水冲洗就行

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