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Dr_劉医生
各环节都有,取材的样本是否新鲜,制备的悬液是否有杂志;抗体的特异性怎么样,染色剂的问题,制片的流程,洗片是否干净等等
土井挞克树
一抗用多克隆抗体容易出现非特异性染色,建议用高纯度,高效价的针对更具特异性抗原决定簇的单克隆抗体来解决。单克隆抗体很贵,不过结果真的很好。尤其是背景非特异性染色不会太深。真是一分价钱一分货。一抗过期也会造成杯具,所以要注意抗体的有效期。
NatureBios
样本是否新鲜,抗体的特异性,实验中如干片,封闭等细节均有可能导致非特异染色,可以按照SOP规范操作,即使出了问题也能很好的分析原因