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        关于细胞凋亡的流式细胞术

        user-title

        Dr_Blue

        流式细胞术的图怎么看呀?

        wx-share
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        2 个回答

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        流式图有很多种,最常用的是流式直方图和流式散点图,还有流式等高线图。流式直方图只能显示一个通道的信息,流式散点图和流式等高线图可以同时显示2个通道的信息。

          流式通道

          散射光通道

          散射光通道有两个,包括FSC通道和SSC通道,一般所有的流式细胞仪均有这2个散射光通道;

          FSC,即前向角散射,它的值代表细胞的大小。细胞体积越大,其FSC值就越大。所以可以利用细胞的FSC值初步比较细胞的大小,利用FSC值对细胞进行分群和分类。

          SSC,即侧向角散射,它的值代表细胞的颗粒度(granularity)。细胞越不规则,细胞表面的突起越多,细胞内能够引起激光散射的细胞器或者颗粒性物质越多,其SSC值就越大。所以可以利用细胞的SSC值初步比较细胞的颗粒度,利用SSC值对细胞进行分群和分类。

          一般在硏究细胞样品时,首先关注的就是样品中细胞的FSC-SSC散点图,x轴代表FSC值,y轴代表SSC值,将细胞都显示于该散点图中,可以初步根据细胞的大小和颗粒度对细胞进行分群和分类。样品细胞不需要标记任何荧光素偶联抗体,直接上样分析就可以得到样品细胞的FSC值和SSC值,其值代表的是细胞的大小和颗粒度这两个基本的物理特征,所以样品的FSC-SSC散点图又称为样品细胞的 “物理图”。

          荧光通道:

          不同型号的流式细胞仪其荧光通道的多少差异较大,有的甚至没有荧光通道。

          荧光通道表示的不是细胞特有的物理特征,而是其化学特征。如需要检测样品中是否有细胞表达某一CD分子,则需要标记荧光素偶联的该CD分子的抗体,表达有该CD分子的细胞就会结合荧光素偶联抗该CD分子的抗体,表达有该CD分子的细胞就会结合荧光素偶联抗体,其中的荧光素被相应的激光激发后产生荧光,该荧光信号通过光路系统被相应的荧光通道接收,就能得到该样品中是否有细胞表达该CD分子,以及有多少比例的细胞表达该CD分子等信息。荧光通道接收到的信号越强,表示细胞上结合的荧光素越多,那么细胞表面表达的该CD分子就越多,因此可根据荧光信号的强弱判断细胞表达该CD分子的相对数量。总之,荧光通道值反映接收到的荧光信号的强弱,从而反映细胞上结合的荧光素的量,进一步反映细胞上表达该CD分子的量,最后间接反映细胞表达某CD分子这一化学特征。

          不同细胞群的FSC值和SSC值最多相差几倍,而荧光信号强弱之间一般相

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        左下死细胞的碎片,右下早凋,右上晩凋

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