• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        求助!多肽设计和流氏分选单个B细胞

        相关实验:肿瘤蛋白免疫预防性实验

        user-title

        红豆西米露嘻嘻

        我的目的是制备单抗,想用H1,H3和H5的HA蛋白免疫小鼠,然后进行流氏分选出针对这三种亚型的B细胞。打算设计针对H1,H3和H5的多肽,偶连蛋白,但不知道该怎么做?现在用网站分别对3个亚型预测了抗原表位,不知道能不能用?流氏的门控系统也不知道该怎么设计?求求大佬提点意见!!

        wx-share
        分享

        2 个回答

        user-title

        龙大人驾到

        有帮助

        首先,需要先获取H1、H3和H5三种HA的序列数据,并结合了解相关病原体的生物学特性。接下来,你可以使用不同的软件包(如BLAST)来搜索出与H1,H3和H5 HA蛋白最相似的多肽序列,并建立一个比对记录表。然后,您可以使用不同的软件设计策略来筛选出特异性较强的多肽,这些多肽将用于偶联蛋白。最后,您可以使用不同的蛋白表达系统进行偶联蛋白的表达和检测,以确定其状态和活性。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        您可以考虑以下步骤制备单抗:

        预测的抗原表位的确定性不高,您可以进行实验验证,比如对亚型 H1, H3 和 H5 的多肽单独进行免疫实验,检测其诱导的抗体产生效率。

        对于细胞表达,您可以考虑用载体将多肽基因克隆到细胞中,使用活细胞表达系统,或者采用 in vitro 蛋白表达方法,如细胞外翻译系统,以生产抗原多肽。

        将小鼠免疫,抗原多肽可以用作抗原。可以考虑采用合适的免疫规划,如免疫前先进行基础免疫,然后给予多次免疫以诱导产生充分的抗体。

        进行流式细胞分选。您可以设计针对 H1, H3 和 H5 的抗原的单克隆抗体,并在流式细胞分析中进行鉴定。

        希望这些步骤能为您的研究工作提供帮助。请注意,最终的流式分选结果可能受到多种因素的影响,包括单克隆抗体的灵敏度和特异性,细胞表达的效率,免疫前后的处理等

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序