流式细胞仪器如何调整补偿，关于这方便有什么参考的文献或者书籍吗？

补偿基本方法同下图，更多内容可以直接查看流式细胞术相关书籍。

1.在流式细胞仪上检测未染色的细胞，设定合适的前向散射（FSC）和侧向散射（SSC）设定值和荧光探测器电压（光电倍增管，或PMT）。

2. 选择一管微球样本上机，重新调整FSC和SSC电压，以便在FSC/SSC点图中可以看到微球（可以用未染色微球）。

3. 检测每管单染色微球样本，确保阳性峰值在仪器的检测范围内。如果微球的阳性峰超出仪器的检测范围，应降低PMT电压（尽量最小）。在检查完所有单染色微球之前不必记录任何数据。

4. 依次获取每管单染色微球样本进行补偿调节，储存补偿对照的文件。

5. 重新调节细胞样本的FSC/SSC，不要调节荧光通道的电压值。

调整补偿有以下原则

①多色实验(超过单色)时，所有荧光染料

都要做一个单染孔。

②先设置电压，再调整补偿，保证读取样本

时的电压与调整补偿的电压一致，也就是说

补偿调好之后，不要再改变电压。

③有些抗原表达弱，阳性群不明显，例如

IFN-y-PE，我们可以替换为CD3-PE或补偿

微球替换。

补偿调节：可以阅读王静的流式补偿文章。

流式细胞仪是通过内置的激光器发射激光激发荧光染料，即被488nm或其它特定波长的光激发后，发射出另一特定波长的发射光，并通过光电倍增管或光电二极管将光信号放大转变为电信号或数字信号，并由计算机统计处理为可读数据。

用激光束激发两种或两种以上荧光染料而发出不同波长的荧光，从理论上讲，可以选择光学组件将它们分开，仅使一种荧光被一种荧光探测器收集处理，而检测不到另外一种荧光。但实际上由于荧光素的发射波长是正态或偏正态曲线，即有很宽的范围，荧光素之间的波谱常有重叠现象。由此，我们需要进行补偿调节，补偿的强度将随着各荧光探测器的放大倍数（电压）的变化而变化，特定的电压对应特定的补偿参数。