爬山细胞怎么做免疫组化，HE染色技术，详细步骤，谢谢师兄师姐。

HE染色：

（1）先将长有细胞的六孔板用PBS洗3次

（2）将六孔板浸入95％的酒精固定15分钟
（3）PBS洗2次，每次1分钟
（4）浸入苏木素染液，染色5分钟
（5）自来水浸洗
（6）浸入稀盐酸酒精进行分色，数秒即可
（7）自来水浸洗
（8）浸入淡氨水中，使胞核蓝化，3分钟
（9）自来水浸洗
（10）浸入伊红染液，染色6分钟
（11）自来水浸洗
（12）依次经过70％、80％、90％酒精各1次，95％酒精2次和100％酒精3次逐级脱水，每次1分钟。
（13）通过二甲苯3次，每次1分钟

1.取出细胞切片，迅速放入冷丙酮中固定20-30分钟。 2.在蒸馏水中浸泡两次，每次约5分钟。 3.在冲孔液中浸泡5分钟。 4.在蒸馏水中浸泡两次，每次约5分钟。 5.使用普通血清密封：从染色罐中取出切片，擦去切片背面的水分和切片正面组织周围的水分（以保持组织湿润），并添加正常的山羊血清或兔血清（与二抗相同）动物血清）处理，并在37°C下保持约15分钟。 6.再次添加一抗：用滤纸吸收血清，无需洗涤，直接在37℃下添加一抗约2小时（也可以在4℃的冰箱中放置过夜）。 7.在PBS缓冲液中：5分钟，2次（置于摇床上）。 8.在37℃，40分钟内逐滴添加生物素化的二抗。 9.在PBS缓冲溶液中：约5分钟，2次（置于摇床上）。 10. 37℃40分钟，再次滴加第三抗体（SAB复合物）。 11.在PBS缓冲溶液中：5分钟，2次（置于摇床上）。 12. DAB显色，在显微镜下观察，并及时终止（终止自来水冲洗）。 13.用自来水（纯净水）彻底冲洗。 14.苏木精复染，室温下30秒钟，用自来水冲洗。 15.用自来水冲洗15分钟，以恢复蓝色。 16.梯度酒精脱水：80％，2分钟，95％，2分钟，100％，2次，5分钟。 17.二甲苯透明：I和II（二甲苯）各5分钟18.安装：加拿大胶（或中性胶）