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        免疫荧光中DAPI 信号过强甚至看不清细胞核轮廓和核仁是什么情况?

        相关实验:细胞膜表面分子免疫标记

        user-title

        dxy_k5jymqe2

        染细胞或组织 最后一步染DAPI 浓度在工作浓度范围内 时间十分钟 洗三遍 但是有时候会遇到一部分染的信号过强 明显是错误的 且也有细胞染的正常 请问是封片问题还是其他问题 如何处理?

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        3 个回答

        user-title

        dxywode

        有帮助

        1.组织切片太厚:这种情况下可以选择将组织切片变薄试试。
        2.封闭不佳:封闭的目的就是为了减少非特异性的结合,减少背景染色。如果背景太强,可以考虑换种封闭液或者增加封闭孵育的时间。

        user-title

        府宅

        有帮助

        结果出现这种现象很有可能是抗体比例太低,需提高抗体浓度,可配合提高二抗 浓度;共聚焦的激发荧光强度不够大;二抗孵育时是否是对应的种属

        user-title

        dxy_gwrp7ndq

        有帮助

        在细胞核用DAPI染过之后,在免疫荧光下出现类似于月亮的图像(月亮仔细看也有阴影),这是非常正常的,因为你的DAPI无法染核仁,所以空心的就是核仁!

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