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        ELISA 酶联免疫吸附实验步骤一、四中的抗体是同一个吗?

        相关实验:酶联免疫吸附(ELISA)实验

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        方兴保

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        3 个回答

        user-title

        论坛小助理

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        两个步骤的抗体是不一样的。 一个是抗原决定簇“可能”不一样,另外一个步骤五里的抗体是“酶标记特异性抗体”,加了一些“酶”(常见的如辣根过氧化物酶HRP,碱性磷酸酶AP)来做后缀物,是用来和步骤七里面的“底物”反应显色用的。而步骤一的抗体没有加酶来缀,只是包被在培养板上做固定相。
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        xinqingruyu

        有帮助
        步骤四是洗涤步骤,没有抗体,步骤五有抗体。步骤一的抗体和步骤四的抗体,可以是同一种抗体,也可以是不同种抗体,这样根据具体实验而确定,但是这两种抗体又是有区别的,步骤一的抗体作用是一端吸附于酶标孔,一端吸附待检物质,步骤五是被标记物(如HRP)标记的抗体,作用是放大前面步骤的反应效果,便于测试。
        user-title

        phhcrab

        有帮助
        步骤四没有抗体呀?你说的是步骤五吧?不是同一个,包被的是一抗,不带检测标记的,加样本后再加的是二抗,通常带有HRP或者AP标记,最后加入酶底物显色后,可通过相关的仪器进行OD值检测。
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