实验问答21,907,609 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问请教各位，我打算把db/db小鼠分为OGTT前和OGTT后两组做代谢组学，同时添加野生型对照

huarenqiang5

你这差距比较大，对实验结果影响比较大。

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问大鼠腹腔神经节寻找，求教

烧伤科常医生

腹腔神经节定位：腹腔注射麻醉动物，剖开腹腔翻开大网膜，暴露出腹主动脉与肠系膜上静脉在其交叉处附近找出灰白色结节状腹腔神经节

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问求助！大鼠腹腔注射水合氯醛后4天，接连死亡，为什么啊

沫子大大

可以降低浓度，我一般用5％进行麻醉，其次注射时可以进行回抽看看，不要刺破脏器。

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问组织切片

烧伤科常医生

学好组胚，详细了解病史。读懂切片没什么窍门，无非是多学多看。先从最简单的开始，比如说血管，有什么结构，大致有什么类型的病变。买本诊断病理学对着看看。再一个就是多去病理网基础病理板块看看。不懂的地方可以在论坛多提问。

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问如何进行高量子核酸测序？

烧伤科常医生

有两种方法：Sanger测序和高通量测序。Sanger测序是一种传统的测序方法，它基于DNA聚合酶的作用，通过逐步合成DNA链来确定核酸序列。这种方法的优点是准确性高，但速度较慢，只能测定较短的DNA序列。高通量测序则是一种新兴的测序技术，它利用高通量测序仪器，可以同时测定数百万个DNA分子的序列。这种方法的优点是速度快，可以测定大量的DNA序列，但准确性相对较低。

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问培养含有kana和amp抗性DH5a有什么区别吗？这两种菌摇浑浊的时间不一样

balalaLy

没有什么区别，就是要分别加对应的抗生素，浑浊时间主要跟挑菌的数量以及细菌活性有关。时间长短没有什么影响的

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问求助，鸡白痢沙门氏菌在ss琼脂培养基上的菌落形态，以及为什么会使ss培养基由红色变为黄色？

sswei

由于细胞代谢产酸，培养了细胞后的培养基会从红变黄。

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问怎么理解适应性免疫的特点：耐受性

loveliufudan

适应性免疫的”耐受性”指的是免疫系统对于它自身正常组织的容忍能力。适应性免疫系统在识别和攻击外来抗原的同时，也需要保持对自身组织的不攻击，以防止自身免疫疾病的发生。适应性免疫的耐受性是通过多种机制来实现的。这些机制包括： 1. 免疫耐受的建立：在胚胎发育和早期生命阶段，免疫系统会受到调节，以识别和容忍自身组织。这个过程中的异常可能导致免疫系统攻击自身组织，引发自身免疫疾病。 2. 免疫耐受的维持：

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问求助，效价测定

sswei

全血应保存于4±2℃内，否则易凝固变性失活，影响效价结果。

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问为什么不提BCR（B细胞受体）？

sswei

B细胞在分化的大多数阶段表面有免疫球蛋白（SIg）分子，每个正常B细胞在分化的不同阶段或同一阶段上可产生几种不同类型的重链IgM（μ）、IgD（δ）、IgG（γ）、IgA（α），B细胞成熟为浆细胞则失去SIg出现胞浆内免疫球蛋白（CIg），但轻链都为同一型，κ或λ。因此免疫球蛋白中与BCR相关。

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问使用硫酸铵进行盐析，无沉淀析出

loveliufudan

胶原蛋白的提取和析出可能受多种因素影响，以下是一些可能导致你没有得到期望沉淀的原因： 1. 样品源问题：可能是你的初始材料中胶原蛋白的含量较低，或者在提取过程中胶原蛋白已经被破坏或降解。 2. 盐析条件：硫酸铵的浓度对蛋白质的沉淀有很大影响。如果硫酸铵的浓度过高或过低，可能会影响胶原蛋白的析出。在这种情况下，可能需要调整硫酸铵的浓度。 3. pH和温度：胶原蛋白在一定的pH和温度范围内稳定。如果条

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问细胞培养为何加了双抗仍存在污染

土井挞克树

加双抗只是有一定的预防作用，但不能避免污染现在很多细菌对双抗都有耐药性，所以加了也不一定就能杀死；双抗的保存方式的问题，青霉素在37℃下很快就会分解掉；还有看污染的细菌是不是在抗菌谱中；如果是真菌的话双抗就没有什么用的；

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问做CRP试纸，微球和抗体的偶联比例多少，试纸条喷量多少，能让HOOK效应出现在100mg/L以后？

huarenqiang5

微球和抗体的偶联的比例是1:5。试纸条一般喷量是0.2mg。

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问胶体金试纸条，为什么金标抗体和T线不同文献差别那么大，多抗好还是单抗好，一种单抗好还是两种单抗好

loveliufudan

以下是一些考虑因素： 1. 多克隆抗体：由于其可以识别抗原的多个不同表位，多克隆抗体可以提供更强的信号和更高的灵敏度。然而，它们可能会引入更多的非特异性反应。 2. 单克隆抗体：单克隆抗体只识别抗原的一个表位，所以它们的特异性通常更高。但是，如果这个表位在抗原的自然变异中发生了变化，那么这个单克隆抗体可能就无法识别变异后的抗原。 3. 使用两种单克隆抗体：使用两种单克隆抗体可以增加检测的特异性，因

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问胶体金试纸条的金标抗体包被和T线抗体包被，为什么很多文献使用的是两种不同单抗，如果只筛选出了一种单抗

土井挞克树

因为两种抗体识别的抗原不同，为了保证筛选的有效性一般都是两种抗体

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问GraphPadprism计算IC50后，从哪里可以看到标准偏差。或者抗肿瘤活性做完Ic50了。那个文献里面的±标准偏差是怎么算。

土井挞克树

1、打开GraphPadPrism5．0软件，点击column．2、然后点击create3、在title输入组别，在Y下面输入实验数据4、点击左侧graphs底下的data15、点击analyze6、选择columnstastics点击OK，弹出如下界面这个界面就有标准偏差了

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问鳞翅目昆虫抗氧化酶家族相关基因怎样筛选？

dxyc42u

首先你要分析已有的两个基因的同源性，并到Genebank等数据库中进行比对，确定两个基因是否具有保守结构域，如果有，你可以根据其保守结构域设计简并引物，到你的目的基因组中扩增新的基因片段。或者以两个已有基因的保守结构域为探针，采用杂交的方法（前提是你要有构建好的基因组文库）钓取含有同样保守结构域相关的基因。如果二者不具有保守结构域或者同源性不高，那么你的实验设计就不可行了。

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问荧光定量检测CRP试纸，HOOK效应一般出现在什么浓度比较好？

sswei

当抗原抗体出现HOOK时经常会超出检测限而不能准确定量的检测出相关的数值，只有抗原抗体比例合适时才出现最强的反应，在检测限内检测出准确的数值。

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问PCR溶解曲线出不来这是什么原因？

huarenqiang5

考虑以下几点原因:1、引物没有设计好，溶解曲线就是为了区分样品是否有非特异性扩增和初始模板有无被污染的情况，实验室用BIOGHC-PCR检测了DNA，如果出现单一峰且峰值在Tm值位置出现，这就证明没有非特异性扩增，且初始模板没有被污染。2、没有给数据编号，数据在分析的时候需要分组。

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问产气袋一次能够用多久？

dxyc42u

2.5L的那个一般够用2-3天

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