丁香实验_LOGO
登录
搜索
    搜索
    提问
    我要登录
    ｜免费注册

    wb实验中，不同组织间上样量一致，跑出来的内参条带不均一，是什么原因，应该如何解决？

    相关实验：蛋白质免疫印迹(Western Blot，WB)

    user-title

    dxy_3f3x8z95


    wx-share
    分享

    1 个回答

    user-title

    dxy_z33f7k07

    有帮助

    有做BCA测蛋白浓度吗？如果测了蛋白浓度，且保证上样浓度一致的话，想问一下你都是哪几个组织？用的是哪个内参？因为不同组织内参的表达量确实会出现不太一致的情况，最好使用那种不同组织间表达比较稳定的内参。另外就可能是BCA测的不是特别准确诶

    user-title

    dxy_3f3x8z95user-title

    我是用了BCA测定了浓度的，我做的是鱼类，分别是鳃，肾，脑三个组织，内参用的EF-a,现在我正在重新做一遍。

    user-title

    dxy_z33f7k07

    我当时做过草鱼和鲤鱼的脑和肝脏，用的是GAPDH，BCA定量后，跑一次如果不太齐，测完灰度值后再调整上样量，在跑一次，还是比较稳定的。偶尔也会用β-actin

    ad image
    ad image

    相关产品推荐

    Western快速转膜液，10X，阿拉丁

    Western快速转膜液，10X，阿拉丁

    ￥68.90

    Western blot 封闭液，阿拉丁

    Western blot 封闭液，阿拉丁

    ￥242.90

    FlexiWash全自动蛋白质免疫印迹系统-Cellagen

    FlexiWash全自动蛋白质免疫印迹系统-Cellagen

    询价

    WB裂解液

    WB裂解液

    ￥169

    Western及IP细胞裂解液，无抑制剂，阿拉丁

    Western及IP细胞裂解液，无抑制剂，阿拉丁

    ￥227.90

    相关问答

    问

    WB条带灰度值计算

    6097 围观
    2019-05-15

    问

    flag标签抗体结果出现非特异性条带

    7080 围观
    2019-04-09

    问

    WB蛋白上样量

    8192 围观
    2018-12-27

    相关方法

    Western印迹法

    底物化学发光ECL法

    图解

    推荐阅读

    丁香实验推荐阅读

    WB 实验背景很脏是什么原因？该如何解决？

    烘箱在使用中应该注意的事项

    在WB实验中为什么需要使用内参抗体？

    无忧采购 轻松科研

    无忧采购 轻松科研

    提问
    扫一扫
    丁香实验小程序二维码
    实验小助手
    丁香实验公众号二维码
    扫码领资料
    反馈
    TOP
    打开小程序