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        wb实验中,不同组织间上样量一致,跑出来的内参条带不均一,是什么原因,应该如何解决?

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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        dxy_3f3x8z95

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        1 个回答

        user-title

        dxy_z33f7k07

        有帮助

        有做BCA测蛋白浓度吗?如果测了蛋白浓度,且保证上样浓度一致的话,想问一下你都是哪几个组织?用的是哪个内参?因为不同组织内参的表达量确实会出现不太一致的情况,最好使用那种不同组织间表达比较稳定的内参。另外就可能是BCA测的不是特别准确诶

        user-title

        dxy_3f3x8z95user-title

        我是用了BCA测定了浓度的,我做的是鱼类,分别是鳃,肾,脑三个组织,内参用的EF-a,现在我正在重新做一遍。

        user-title

        dxy_z33f7k07

        我当时做过草鱼和鲤鱼的脑和肝脏,用的是GAPDH,BCA定量后,跑一次如果不太齐,测完灰度值后再调整上样量,在跑一次,还是比较稳定的。偶尔也会用β-actin

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