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        是loading buffer出了问题还是胶出了问题?

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

        user-title

        dxy_5690cfnq

        图片描述

        最近两次跑电泳都是这样,感觉没有压的很齐,之前loading buffer都是压成一条线一起跑的,这次不知道为什么这样了?是loading buffer出了问题吗?还是胶出了问题,loading buffer是最近新配的。


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        11 个回答

        user-title

        dxy_kqm3zpd0

        有帮助

        感觉是有漏液,导致两边电流不稳定

        user-title

        feixue7758527w

        有帮助

        你可以继续下面的实验看看,如果后面显影后还好,就是loading buffer出问题了。如果后面显影也不行,就是下面的胶不行的。

        user-title

        marklily

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        请问是Western Blot实验吗?

        user-title

        土井挞克树

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        胶的可能性更大,压胶没有压齐。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        从图片上来看主要考虑是胶的问题。

        user-title

        粥辰辰辰辰

        有帮助

        重新配胶,有时胶未混匀和没凝好,会出现这样的问题。

        user-title

        此用户已注销

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        看看配制有没问题,另外跑胶的时候注意有没有漏。

        user-title

        zjcxchentian

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        有没有可能是你每个泳道所加的蛋白量或者体积差别过大

        user-title

        周末也要努力呀

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        loading过稀,胶没有混匀,还有上样量是不是太少?都会影响

        user-title

        balalaLy

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        压缩效果主要跟loading buffer中巯基乙醇有关。跟胶没有多少关系。另外不一定要完全压成一条线

        user-title

        高山云初

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        可能是电泳时间不足导致 marker 只跑了一半。在 Western电泳的过程中,marker和样品需要一定的电泳时间才能完全分离。如果电泳时间不够,marker可能只跑了一半,而样品仍然停留在凝胶的顶端。如果凝胶质量不佳,也可能会导致 marker 只跑了一半。可能是凝胶浓度、pH值、聚合时间等方面出现了问题。在这种情况下,需要重新制备胶。

         

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