救命，为啥两张膜都出现了这样的情况？是同一个槽的两张膜都这样，是膜本身的问题，还是都没有转过去？

分析建议如下:

1. 由于两张膜结果一致,问题很可能出在转膜这一步。

2. Marker 能显示表示转膜系统本身没有问题,膜也成功激活。

3. 目标蛋白可能转移不足,原因可能是:

(1) 转膜电流过小,蛋白转移效率低

(2) 转膜时间不够,应适当延长

(3) 转移缓冲液配方问题,可调整pH、增稠剂等

4. 建议重复转膜,适当增大电流,延长时间,确保蛋白有效转膜。

5. 转膜后可用Ponceau S染色检查膜,确定蛋白是否转移过来。

6. 也可尝试修改转移缓冲液配方,增强转移效率。

7. 其他步骤如酶联免疫反应需要排除问题。

感觉是没转过去，滤纸有没有问题，像是有个大泡没除掉，要么就是没夹紧，夹子松了，中间出现空泡

膜的问题。要么是转膜时没有充分激活，要么是膜上面有油脂类的东西，tbst中土温的浓度适量增大，洗膜的时间次数增加