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        求助!TGF- beta 刺激HUVEC细胞构建纤维化模型,细胞种6孔板的密度该是多少呢?

        相关实验:血清制备实验

        user-title

        取个名字这么难呢

        TGF- beta的浓度可以5ng/ml 48h,或者10ng/ml 24h吗?血清饥饿培养是怎么做啊?好多问题啊😭刚开始做实验,啥也不懂,求大神指教

         
         

         

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        2 个回答

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        细胞密度5×10^6~1×10^7/mL。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        对于构建纤维化模型的HUVEC细胞,以下是一些建议:

        1. 细胞密度:细胞密度的选择可以根据您的实验需求和细胞生长特性来确定。一般来说,对于6孔板,细胞密度可在2-5 x 10^4个细胞/cm²之间,具体密度取决于您的实验需求和细胞的增殖速率。您可以尝试不同的密度,并根据实验结果来确定最佳的细胞密度。

        2. TGF-beta浓度和处理时间:TGF-beta是诱导纤维化的常用因子。根据您的实验目的和文献报道,TGF-beta的浓度可以选择5 ng/mL持续刺激细胞48小时,或者10 ng/mL刺激细胞24小时。这两个条件都可以作为初始试验条件,并根据您的实验结果进行优化。

        3. 血清饥饿培养:血清饥饿培养是指将细胞在不含血清的培养基中培养,以减少血清成分对细胞生物学过程的影响。血清饥饿培养可通过以下步骤进行:

        a. 将细胞培养在完全培养基中,直到达到所需的细胞密度。

        b. 将培养基更换为不含血清的培养基(如无血清DMEM或无血清RPMI 1640培养基),添加必要的补充物(如抗生素和其他细胞培养所需的添加剂)。

        c. 将细胞在无血清培养基中培养一段时间(如24-48小时)。

        d. 进行实验或添加适当的刺激因子。

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        取个名字这么难呢user-title

        那请问无血清培养结束后加药需要换成有血清的吗?

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