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        western blot 用牛奶封闭和BSA封闭有什么区别?什么时候用BSA封闭?

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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        dxy_cvb7k0yr


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        4 个回答

        user-title

        feixue7758527w

        有帮助

        我还是觉得脱脂牛奶封闭更适合普通WB实验的,BSA比较贵,对于牛奶封闭后背景比较杂或者信号高的,可以考虑BSA封闭的。

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        理论上来讲牛奶更适合做封闭,能封闭更多的非特异位点,但是实际操作上来看,差别不大。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        下面是牛奶封闭和BSA封闭之间的区别以及何时使用BSA封闭的一般指导:

        1. 牛奶封闭:牛奶封闭是使用非脂肪牛奶(通常是脱脂牛奶)来制备封闭溶液。牛奶含有大量的蛋白质,其中一部分可以与非特异性结合位点结合,从而阻止非特异性结合。牛奶封闭通常用于常规的Western blot实验中,可以提供较好的背景抑制效果。

        2. BSA封闭:BSA是牛血清蛋白的一种形式,具有更高的纯度和较低的背景信号。BSA封闭溶液通常制备使用0.5-5%的BSA。BSA相对于牛奶具有更低的背景信号,并且对一些特定的抗体和靶标具有更好的阻断效果。BSA封闭通常在特定的应用中使用,例如对某些蛋白质相互作用或低丰度蛋白的检测等情况下,可以提供更清晰的结果。

        选择牛奶封闭还是BSA封闭可以根据实验需求、特定抗体和靶标的性质以及文献报道来决定。在常规的Western blot实验中,牛奶封闭已被广泛应用并提供可靠的结果。如果你在使用牛奶封闭时遇到高背景信号或其他问题,可以尝试使用BSA封闭进行优化,以提高特异性和降低背景信号。

        user-title

        sswei

        有帮助

        做WB一般很少用BSA封闭,5%的脱脂牛奶含有的蛋白比较全面,封闭比较完全,非特异性结合少。 脱脂牛奶封闭在western blot中是一种很常规的方式,一般实验室都在用。 而BSA封闭倒是可以在做免疫组织化学的时候用,虽然贵点,但是用量较少。 BSA用在免疫组化这种特异性较强的实验中效果好,脱脂牛奶封闭更全面适合wb

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