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        关于脱脂奶粉和BSA作为封闭剂的一些问题

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        生物实验中的封闭剂

        Q:western blot 中脱脂奶粉封闭的是哪些蛋白?原理是什么?

        A:脱脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。原理就是用非抗原 的蛋白去封闭膜,避免标记抗体固定在膜上引起背景增高。

        Q:请问封闭液和抗体稀释液用BSA 和脱脂奶粉有什么区别呢?

        有人跟我说奶粉的封闭效果更好些,但是通常只能用于WesterBlot,如果要做ELISA或者phage display时候,蛋白铺板的话,不能使用脱脂奶粉。可是也有人说可以,请问是否有这个说法呢?

        A:所谓封闭是用以减少或消除载体上的非特异性结合蛋白的分子,一般是脱脂奶粉或BSA.对WesterBlot来说两者均为常用封闭剂。脱脂奶粉的成份远较BSA复杂,如果要做ELISA或者phage display时候,我们还是用BSA,有关的操作手册上也是如此。

        我推测也没有依据说脱脂奶粉就绝对不能用,注意的是各种品牌的脱脂奶粉中残留的脂质量不同, 脂质是会影响实验结果的,即使是用于WesterBlot也要有所挑选, 有兴趣可以试试,但是不要在正式实验时试。

        Q:请问大家,封闭的时候,为什么一定要用脱脂奶粉?

        A:膜上有蛋白缺损点,不用蛋白封蛋白缺损点容易出现非特异染色。

        也可用BSA封,效果并不比脱脂奶粉好。

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