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各位大佬,我这个蛋白不压缩是怎么回事啊,一大坨下来了,marker也能散开点,电压是80v,胶凝固的时间按说明书上来的

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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dxy_xr7grklw


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3 个回答

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balalaLy

有帮助

marker没问题,胶没问题,所以应该是loading buffer的问题,有些loading里面含有的巯基乙醇量少或者没有就会压缩不好

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loveliufudan

有帮助

可能有以下几个原因导致蛋白没有被压缩:

没有加足够的SDS缓冲剂或还原剂,SDS缓冲剂可以破坏蛋白的三级结构,还原剂可以破坏二硫键,使蛋白变成线性状态,便于电泳运行。如果SDS缓冲剂或还原剂的浓度不足,可能导致蛋白没有被完全线性化,从而不能被电泳压缩。

没有将蛋白样品彻底沸腾,这可能导致蛋白没有被完全线性化。

电泳条件不够充分,电压和电流可能不够高,时间可能不够长,这些因素都可能导致蛋白没有被完全压缩。

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土井挞克树

有帮助

可以增高电压和作用时间提高蛋白压缩成功率

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