眼科佛系小医僧
上面是目的蛋白,下面是tublin内参,万能的友友们知道为什么目的蛋白有多个条带嘛?抗体是武汉三鹰,一抗稀释3000倍
土井挞克树
可能是目的蛋白存在降解,所以会有多个条带
balalaLy
这个牌子的抗体用过几个都还好吧,一抗浓度再稀释一下,洗膜时间再延长一点。实在不行找厂家换不同批次的。
loveliufudan
可能有以下几种情况:
同一蛋白的不同翻译后修饰形式:蛋白在翻译后会发生不同的修饰,如磷酸化、甲基化、乙酰化等。这些修饰可能导致蛋白的大小、电荷等性质发生改变,从而出现多个条带。
同一蛋白的不同剪切变异体:同一基因可以通过剪切生成多个不同的mRNA,从而产生不同的蛋白变异体。这些变异体可能具有不同的大小、结构或功能,导致在Western blot上出现多个条带。
不同的同源蛋白:某些蛋白可能具有与目的蛋白相似的结构或序列,从而与目的蛋白在Western blot上出现重叠的条带。
如果您确定多个条带都是目的蛋白,则可以尝试调整抗体浓度或使用其他验证性实验来确定多个条带的来源。此外,不同的实验条件(如不同的细胞类型、处理方式等)也可能导致目的蛋白出现多个条带。因此,在解释Western blot结果时,需要综合考虑多种因素。
sswei
可能性:
1.曝光的时候胶片或膜之间发生了轻微的错动;
2.蛋白有部分降解;
3.抗体与杂蛋白有非特异性结合,恰好杂蛋白分子量和目的蛋白分子量相近;
4.蛋白出现了部分降解;如果以上可能性都排除了的话,很有可能发现了目的蛋白的蛋白修饰条带。当目的蛋白在细胞内有磷酸化、乙酰化等修饰存在时会产生卫星条带。