IP急求，好几次了做不出来

有以下几点建议：

确认蛋白质表达水平

首先需要确认蛋白质确实存在且表达水平足够高。您可以尝试增加过表达的细胞培养时间或使用更高浓度的诱导剂来增加目的蛋白表达水平。

确认抗体的特异性和工作条件

确保使用的抗体是特异性的，并且在所用的条件下（稀释倍数、结合时间、温度等）表现出最佳的特异性和灵敏度。可以尝试使用不同稀释倍数的一抗和二抗，调整结合时间和温度等条件，以优化WB实验的结果。

优化IP实验条件

在IP实验中，可以尝试增加抗体的使用量，增加与靶蛋白结合的时间和温度，或者尝试使用其他的IP方法来提高靶蛋白的富集度。

检查SDS-PAGE电泳条件

确认SDS-PAGE电泳条件是否正确。尝试使用不同的电泳条件和电泳时间来优化目的蛋白的分离效果。

确认银染实验条件

在银染实验中，需要注意每一步操作的严格操作，以及银染试剂的制备和贮存条件。可以尝试使用其他的染色方法或再次进行银染实验，以确保结果的可重复性。

我一般是先抗体与裂解液结合过夜，第二天加珠子，银染用梯度胶，你的银染步骤需要再优化。

考虑蛋白表达后的提取过程有问题，蛋白没有有效提取