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        想问一下大佬们,我要测一个放线菌的分泌蛋白的表达量,

        相关实验:细胞分泌蛋白质的含量测定实验

        user-title

        dxy_v16q8y54

        是直接放在培养基里面培养后取上清,离心,得上清液以后怎么测得这些分泌蛋白的种类和表达量哇

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        3 个回答

        user-title

        sswei

        有帮助

        可以采用散射比浊法来测定分泌蛋白的量。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        上清液可以进行免疫荧光实验,验证蛋白的类型与表达。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        通常可以采用酶联免疫吸附实验(ELISA)或蛋白质印迹(Western blot)等方法。

        对于ELISA,可以选择商用的ELISA试剂盒,或者自制ELISA实验。自制ELISA实验一般需要先选择合适的抗体,然后将抗体固定在ELISA板上,再加入待测样品进行检测。具体操作方法可以参考相关文献或者实验室内部的标准操作流程。

        对于Western blot,可以将上清液进行SDS-PAGE电泳分离,然后将蛋白转移到膜上,再用目标蛋白的特异性抗体进行检测。具体操作方法也可以参考相关文献或者实验室内部的标准操作流程。

        需要注意的是,在测量分泌蛋白的表达量时,除了采用上述方法外,也可以考虑利用质谱等技术进行分析。

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