WB内参蛋白跑不好

可以加大上样量，没有问题，还有转移时你可以减少电流延长时间，加20％甲醇；还有一种办法就是采用最新的WES来检测，灵敏度极高，但价格贵。

以下面那张图看，看得出有条带，但是条带不齐，裁膜裁的有点偏上。试试调整一下上样量，裁膜的时候稍微注意点。

内参差距太大的一个原因就是在蛋白定量环节出现了问题。另外条带有拖带，说明变性都没变性好，样本里有沉淀产生，最后一个中间出现了反白现象，说明二抗的浓度也高了，显色时间也没控制好，底物都被消耗完了

我们的抗体是回收的么，是否加入防腐剂？抗体和样本使用后是否冻存，根据描述，这种结果很像抗体或样本降解

样品和抗体反复冻融降解都会出现这种情况，抗体使用次数多，掺入杂质等也会导致。