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wb背景高,内参不齐

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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我的小熊奶黄包

实验室小白,第一次跑wb,各位大佬帮忙看看都有哪些问题,三个组分别是对照,低浓度加药组和高浓度加药组的内参β-actin,高浓度加药组这次细胞几乎都死了,取培养基中死细胞提的蛋白,高浓度组bca蛋白定量是有蛋白的 ,大概2.7ug/ul,但是高浓度组内参都跑不出来,中间两个黑色的点点发光的时候加上发光液有蓝色荧光出现,感觉是蛋白,各位大佬帮忙分析分析是什么情况,谢谢!

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3 个回答

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balalaLy

有帮助

细胞死了蛋白也降解差不多了,所以内参不齐主要还是因为细胞死亡。可以剔除这个浓度了。那两个黑点应该是杂点,脏了。

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我的小熊奶黄包user-title

你好,请问那为什么bca定量的时候高浓度组是有蛋白浓度的?感谢!

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bamboopiggy

有帮助

你高浓度组没法用,你的内参应该是底下的条带,那两个黑点,可能是你转膜的时候,有什么问题。

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土井挞克树

有帮助

图片背景过高有可能是以下原因引起的

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