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请教测trpv1蛋白

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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dxy_hzorqif8

有同学用westren blot测trpv1蛋白吗?想问一下过程中的条件。

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3 个回答

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bamboopiggy

有帮助

trpv1是由838个氨基酸组成的分子量为95kd的编码蛋白,但是你最好看你买的抗体给的size的大小,来切膜,如果不放心,可以跑个全膜看一下

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Eason老歌迷

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trpv1蛋白:96kd大小。

不还是正常的wb流程吗?裂解细胞,上样跑胶,转膜,然后我推荐湿转180ma,转90分钟。孵一抗,然后二抗就选择一抗相对应的种属,然后就是显影。

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TotalA

有帮助

48kd 6次跨膜蛋白 辣椒素受体蛋白因TRPV1,且具有热敏性,样品处理需要注意,总蛋白提取也需要注意,跨膜蛋白在使用RIPA提取总蛋白时容易丢失,可以选择新型柱式法总蛋白提取,如果条带检测弱,可以考虑进行TRPV1蛋白所在质膜的分离富集后,再行检测,WB检测可能更好。总蛋白上样每孔要30ug-40ug,电泳,转膜,封闭,一抗4度孵育过夜,二抗1小时,显影曝光就好了

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