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        实验技术丨求助考马斯亮蓝染胶结果疑问

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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        苦逼实验doge

        图一是我跑的蛋白,只在70kDa处有一条条带,最下面可以看见一坨蓝色的像云雾的东西。

        图二是我师姐之前的实验跑的同款蛋白提取物,70kDa同样有很浓的条带,但是还有很多别的条带,最下面的蓝色云雾也少了很多。

        不知道是啥原因啊,是不是我的蛋白质降解变成小碎片了?所以下面有一坨那么大的云雾呢?

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        3 个回答

        user-title

        inventbiotech

        有帮助

        蛋白降解不像,降解成弥散装。70kd附近条带跟血清白蛋白很像,如果是组织样本可能是血清污染,如果是细胞样本,可能是培养基血清污染,对样本进行清洗应该可以去除污染。最下方是没有区分开的条带,可以用梯度胶进行分离,效果会好一些

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        嗨,你把图放反了,第一个是你师姐的结果,第二个才是你的结果,可以看出来,你的上样量比你师姐少太多,所以那些杂带看不到。不是样品降解了。

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        首先你说的蛋白降解成小碎片,应该是不太可能。可能会有降解,所以提蛋白还是要在冰上进行。是不是你提蛋白的时候没有用pbs把血清洗干净,血清里也有大量蛋白。

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