想问一下以下条带不出还有孔间间隔黑乎乎的是什么原因啊，不止出现过一次了，怎么调整好？

你这是不是孵二抗时间太长了啊!一个小时就够，你这感觉是孵太长时间二抗了，我之前也遇到过这情况。

背景太高了，你试着降低一抗浓度，多洗几遍看会不会好一点

是你的抗体不好使，所以空间的背景也被显影出来了。

频繁出现这种情况要么是抗体不行，要么是蛋白表达太低