WB做的表面蛋白，总是有两条条带

估计跟常温放置有关系，要是多余的那个条带比你的目的蛋白条带小的话，那么可能就是目的蛋白降解了，你可以重新电转再杂交试试。电转后的膜最好要4℃保存。而且，你也可以查查目的蛋白的相关资料，看这个蛋白是不是有不同的多聚体形式，也有可能是这种情况导致的。

两条蛋白，可能是你的蛋白有修饰，所以会出两条带，也可能是本来就是两个variant，长度稍有差异。或者胶灌的不匀，或者抗体特异性差，还有就是buffer可能有问题，总之原因太多了，其实只要你条带的趋势有差异，就可以。

WB有杂带有多种原因的：样品分解，一抗特异性不好或者浓度太高，PVDF膜封闭不够彻底，抗体没有四度过夜，或者上样品太高等