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        整膜敷泛乙酰化抗体,显影70kDa marker那非常黑,求大神解答,感谢!

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

        user-title

        比你可爱

        • 整膜敷的泛乙酰化抗体,封闭2h,一抗过夜,一抗只用过两次,二抗2h

        图片描述

        • 这是整膜蛋白显影结果,黑色那地方对应的是70的marker,已经确定确实是marker不是蛋白,连做了三次都是这样子。

        图片描述

        • 为什么目的条带的地方显影是白色的,而且整膜敷也没有明显的泳道样的蛋白显影结果
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        3 个回答

        user-title

        110徐璐

        有帮助

        这个浓度过高,我认为可以适当调整比例,得到更精确的实验数据,逐步探索吧

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        因为marker也是不同size的蛋白制成的mix,也会和抗体起反应,所以有黑色的条带,你用的是发光试剂显影吧?可能是你的蛋白浓度太高了,把辣根过氧化物酶给消耗干净了,所以反而没有光了,就泛白了

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        二抗太浓了,可以提高稀释比。或者样本有问题,样品浓度太低。

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