整膜敷泛乙酰化抗体，显影70kDa marker那非常黑，求大神解答，感谢！
比你可爱
- 整膜敷的泛乙酰化抗体，封闭2h，一抗过夜，一抗只用过两次，二抗2h
- 这是整膜蛋白显影结果，黑色那地方对应的是70的marker，已经确定确实是marker不是蛋白，连做了三次都是这样子。
- 为什么目的条带的地方显影是白色的，而且整膜敷也没有明显的泳道样的蛋白显影结果
3 个回答
110徐璐
有帮助
这个浓度过高，我认为可以适当调整比例，得到更精确的实验数据，逐步探索吧
bamboopiggy
有帮助
因为marker也是不同size的蛋白制成的mix，也会和抗体起反应，所以有黑色的条带，你用的是发光试剂显影吧？可能是你的蛋白浓度太高了，把辣根过氧化物酶给消耗干净了，所以反而没有光了，就泛白了
天一湖医者
有帮助
二抗太浓了，可以提高稀释比。或者样本有问题，样品浓度太低。
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