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        WB各组间内参的条带差异较大,可能的原因是什么,如何避免。

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        gone with t_hcq9

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        5 个回答

        user-title

        府宅

        有帮助

        WB最关键的还是转膜和敷抗体步骤,可能是您敷抗体的时候敷的不均匀。建议您在仔细的做几遍

        也可能是在显影液环节,简单来说就是您的膜没有淋干净,上面残留参差不齐的 T/TBS,T/TBS 能稀释显影液,目的条带本来表达量就少,某一个点残留的 T/TBS 稍微多一点就可能导致显影效果下降,所以建议在显影液反应前,尽量将膜上的洗膜液淋掉

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        bamboopiggy

        有帮助

        一般会测蛋白浓度,如果上样浓度一致的情况下,最好考虑你的内参是否合适,不行的话,换另外的内参试试。

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        whilt-shirt

        有帮助

        有可能是发光液没加匀,也有可能是转膜没转好

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        跑胶时电流或电压是否太大

        PAGE胶的制备是否正确

        转膜效率是否一致

        user-title

        未来9

        有帮助

        可能是蛋白量不一样,可以根据结果适当调整上样量

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