蛋白质印迹免疫分析时，蛋白质如何转膜？

三明治夹心法，将滤纸 胶 膜 滤纸，制成三明治夹心的方式，然后分干转和湿转，看你的仪器。

1. 将胶浸于转移缓冲液中平衡 10min。注意：若检测小分子蛋白，可省略此步，因小分子蛋白容易扩散出胶。

2. 依据胶的大小剪取膜和滤纸6 片， 放入转移缓冲液中平衡10min。如用PVDF 膜需用纯甲醇浸泡饱和 3-5 秒钟。

3. 装配转移三明治:海绵3层滤纸胶膜，3层滤纸海绵，每层放好后，用试管赶去气泡。切记:胶放于负极面(黑色面)。

4. 将转移槽置于冰浴中，放入三明治(黑色面对黑色面)，加转移缓冲液， 插上电极，100V，1h(电流约为 0.3A)。

5. 转膜结束后，切断电源，取出杂交膜。

一般采用的是湿法转膜，顺序为海绵、滤纸、胶、膜、滤纸、海绵。