WB条带大小和预期差别大，变性后的样品大蛋白降解快怎么办呢？
dxy_mvxncxt2
变性后的样品应该-20保存还是-80保存？每次融化是冰上融化好还是37°加热好？还是100°煮沸好？
3 个回答
whilt-shirt
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有可能蛋白未充分变性，建议重新提取蛋白，一般变性后的蛋白-20保存，使用前室温溶解
丁香粉猪猪
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处理方法：样本制备过程中尽量保持低温，避免蛋白变性、降解、断裂，对于胃肠胰等蛋白酶含量高的样本建议添加蛋白酶抑制剂，蛋白酶抑制剂建议新鲜配制
天一湖医者
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确定蛋白是内源的还是外源的，如果是外源蛋白是不是全长序列
SWISSPROT 数据库查询该蛋白是否有其他 isoform；
SWISSPROT 和文献查询蛋白质是否有剪切活化，剪切活化造成蛋白变小；
确定蛋白质是否是二聚体或多聚体。
NCBI 和 SWISSPROT 查询蛋白质表达后是否有修饰，如有修饰会导致蛋白质增大；
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