WB条带大小和预期差别大，变性后的样品大蛋白降解快怎么办呢？

有可能蛋白未充分变性，建议重新提取蛋白，一般变性后的蛋白-20保存，使用前室温溶解

处理方法：样本制备过程中尽量保持低温，避免蛋白变性、降解、断裂，对于胃肠胰等蛋白酶含量高的样本建议添加蛋白酶抑制剂，蛋白酶抑制剂建议新鲜配制

确定蛋白是内源的还是外源的，如果是外源蛋白是不是全长序列

SWISSPROT 数据库查询该蛋白是否有其他 isoform；

SWISSPROT 和文献查询蛋白质是否有剪切活化，剪切活化造成蛋白变小；

确定蛋白质是否是二聚体或多聚体。

NCBI 和 SWISSPROT 查询蛋白质表达后是否有修饰，如有修饰会导致蛋白质增大；