• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        提出来的蛋白浓度太低,比如低于1ug/ul,有什么办法提高蛋白浓度吗?

        user-title

        陆豆格格

        wx-share
        分享

        5 个回答

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        1、增加细胞量,比如两瓶细胞一起提蛋白。2、减少裂解液用量,比如200ul,浓度可能会加倍。3、延长裂解时间。4、改变方法:

        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        减少裂解液体积,或者增加样本量

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        可以试试用超滤柱超滤,或者将蛋白沉淀后重悬,或者用5x的loading,增大上样体积。

        user-title

        dxywode

        有帮助

        1、细胞量少2、裂解液量过大3、裂解不充分。针对以上,以下供楼主参考:1、增加细胞量,比如两瓶细胞一起提蛋白。2、减少裂解液用量,比如200ul,浓度可能会加倍。3、延长裂解时间,并且反复吹打,10min吹打一次。4、改变方法:用细胞刮刀将细胞刮下,离心收集细胞,在离心管里裂解细胞(如有超声,可以加超声)。这种方法,可以每瓶细胞只加100Ul左右的裂解液,浓度大概在5-10mg/ml.

        user-title

        未来9

        有帮助

        可以少加RIPA,或者把贴臂细胞消化下来后取细胞沉淀再加裂解液,看能否提高浓度,能杂出条带就有希望,每次都做内参,同一张膜做,看下趋势是否还是随机

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序