• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        表达标签蛋白的时候,蛋白标签放在哪段?

        相关实验:用于蛋白质表达的标签实验

        user-title

        dxy_bl5cvpv4

        家人们,大家表达含有标签的蛋白的时候,标签放在蛋白的哪一端呢?N端还是C端?另外,该如何选择蛋白标签呢?

        wx-share
        分享

        5 个回答

        user-title

        水木杰

        有帮助

        如果没有信号肽的话,n端和c端同时做,综合表型来看,哪个做出来用哪个,都做出来首选c端。当然,这两个都不行的话,只有放中间了

        user-title

        迟C迟

        有帮助

        C端N端都有,看你们实验室载体情况 。比如我们实验室就喜欢在基因后面加GFP标签。

        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        如果把蛋⽩标签放到N端,对于⼀些⽐较难表达的和蛋⽩太⼩容易被降解的蛋⽩,我们可以利⽤N端的蛋⽩标签。它可以保证蛋⽩的稳定性,同时不会对外源蛋⽩的免疫原性造成很⼤的影响,这种⽅法⽐较适合⽤于表位筛选。

        但,凡事也有两⾯性,如果你要做的是分泌蛋⽩的话,会有这样的问题,在蛋⽩分泌到⾼尔基体的过程中,蛋⽩N端的信号肽,会被酶切掉。这样,你标签要是装在N端,就基本⽩瞎了

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        尽量放n端吧,我放c端,可以做ip,但wb做不出来。一般选择flag,myc,gfp,his等常用的标签都可以,这些都是大家常用的

        user-title

        未来9

        有帮助

        根据以往的经验更建议添加在C端,主要基于两个原因,一个是因为如果标签蛋白在目的蛋白的C端,当实验可以检测到标签蛋白的表达的时候,理论上 目的蛋白肯定也已经表达

        第二个原因,有些蛋白会在 N端含有信号肽,如果将标签蛋白添加在目的蛋白的N端,当目的蛋白在 信号肽行使完其功能后就会被剪切掉,这个时候标签蛋白也会随之被剪切,那么就不能实现添加标签蛋白的目的了。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序