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二抗孵育的时间不宜过长,一般是室温下摇床孵育1~2小时,抗体孵育完成后要清洗干净,特别是二抗孵育完成后,否则可能导致显影结果出现高背景。
whilt-shirt
这个根本没有条带,考虑抗体问题,建议更换一抗
bamboopiggy
将蛋白浓度加大试试,或者加大抗体浓度。如果都没有条带,试试跑全膜看看
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