条带总有杂带如何破?

杂带原因：

1. 抗原的蛋白水解分解。

这种情况并不少见，特别是如果样品储存时间过长，或者在起始组织均质化后分离蛋白质或膜。所有附加条带的表观分子量均低于全长蛋白质。特别易感的是突触蛋白和突触结合蛋白。应考虑添加蛋白酶抑制剂，如 PMSF、胃蛋白酶抑制剂或亮抑酶肽。

2. 每条泳道蛋白质过多或检测系统过于敏感。

蛋白质免疫印迹法中，凝胶过载是“鬼带”的常见原因之一。固定的蛋白质可以提供一个集中的吸附表面，某些 IgG 可以非特异性地结合到该表面。类似地，当使用高度灵敏的检测系统（例如增强的化学发光）时，可能会发现这种非特异性结合。起始材料的一系列稀释通常会澄清哪些信号是人为的。

原因：胶未配好(凝胶未能完全聚合，胶中有颗粒或气泡，凝胶未冷却好，);电压过高;

解决方法：正确添加质量合格且未过期的 AP 及 TEMED;过滤配胶的试剂保证配胶过程中胶内无气泡;凝胶冷却好后再上样;降低电压

如果主带和杂带颜色深度差异很大，可以减少曝光时间。如果差异不大，且趋势一致，可以保留。如果实在要求完美，可以考虑换一家公司的抗体试试。