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        WB封闭时,什么时候用脱脂牛奶,什么时候用BSA?

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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        dxy_wuwcu5g

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        3 个回答

        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        个人感觉如果是抗体说明书上要求用BSA封闭的话那肯定是要比用牛奶封闭效果好了,至于用牛奶封闭的效果比不上BSA,似乎只是某些战友的经验而已,曾经试过用5%的牛奶和5%BSA比较了一下效果,总体上看来没什么区别的。特别是做磷酸化蛋白的时候,还是用BSA好些。

        user-title

        dxy_gwrp7ndq

        有帮助

        封闭时一般用5%脱脂牛奶,也可用1-5%BSA或1%无蛋白封闭液;配制二抗稀释液一般为1-5%脱脂牛奶,全部用PBS稀释

        user-title

        府宅

        有帮助

        做磷酸化蛋白一般不用脱脂奶,因为脱脂奶中有磷酸化蛋白,会使背景加深。其他时候一般BSA和脱脂奶通用就好了
        根据经验来说,如果strip液洗过的,用脱脂奶感觉封闭的好一点

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