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        蛋白质测序结果多次失败,怎么提高实验的成功率?

        相关实验:蛋白质测序

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        凌云38729

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        1 个回答

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        在目前条件下,质谱很难100%给出肽段的序列,经常会丢失一些肽段,蛋白质磷酸化修饰也会抑制胰蛋白酶的酶解,并且磷酸化肽的含量较非磷酸化肽段的含量少很多,质谱对质谱分析仪磷酸化肽的响应就可能会被抑制。因此,要尽可能把非磷酸化肽段的含量降到。减少非磷酸化肽的方法有分馏、IMAC(固相化金属亲和色谱)和抗体结合。通过MALDI-TOF-MS测定肽段的分子量,根据所得肽段分子量比预计的分子量大80Da或其整倍数,判定是否存在磷酸化修饰。

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