1:WB一抗二抗配好后4℃保存能多久?一个月怎么样?另外,丽春红然后没有洗干净就放入抗体工作液中会不会影响抗体的质量?但是我最后发光就是白板一个,什么都没有啊!一抗(博士德,兔抗小鼠,1/300),二抗碧云天(山羊抗兔,1/1000)都孵育过夜,就是显不出来!郁闷啊!2:我现在怀疑转膜的问题了,300ma一个小时,一起是BIO-RAD的,用0.22和0.45的膜都试过了,每次甲醇激活30s,再把膜放超纯水里泡两分钟再转,但就是做不出来啊!我新配的转膜液第一次转的时候,在300ma条件下电压能达到180v,但是到第三次用的时候电压就上不去了,只有110v,但电流依然300ma,难道转膜液每次都要新配吗?我已经做了两个月了,前面还出来了两次内参,还蛮漂亮的,但是现在内参都不出来了,心里真的很焦急,做过实验的战友都能理解我的这种心情,期盼大家的解救啊!3:身在重庆,顶着每天40℃的高温,实验又做不来,每天还要往实验室跑,开始买的试剂都用了一大半了,心情真的很差!