胶片定影之后显得有点暗，不够清亮是不是定影液的问题呢？

我想问一下，胶片定影之后显得有点暗，不够清亮是不是定影液的问题呢？还有关于marker说明书上，它的条带是以12%的分离胶跑出的条带。我用的是10%的，而且电泳时，最下面的线也没有跑出去。对照marker时感觉有不同，就对杂出来的蛋白不能很好的确定大小。是不是需要做marker说明书上一样的12%呢？