WB 没有看到条带是什么原因？
余香的科研僧
昨天 WB 发光，什么都木有出来，没看到条带，师姐说是荧光淬灭，我查了以下资料关于荧光猝灭的原因，但没搞懂，请各位大神帮忙，告诉我一个实际点策略：在做 WB 从封闭到显影过程中步骤中，哪些会导致荧光猝灭，如何尽量避免？
3 个回答
Neuron_Glia
有帮助
若抗体中有防腐剂，如叠氮钠，会使荧光猝灭；另外，荧光越强，淬灭越快。但是你看不到条带，最可能的原因还是抗体效价较低或浓度不足。
wuhao88
有帮助
二抗浓度太高导致辣根过氧化物酶HRP太高，ECL底物接触到大量HRP时很快反应完，可以把二抗再稀释一下试试，要是每种抗体都这样可能是ECL的问题，有些保鲜膜也可以引起淬灭。
wangch84
有帮助
ECL发光液遇水就会淬灭，所以在使用时需要把膜上的洗液吸干。
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