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        RIPA 裂解细胞过程中体积逐渐变少怎么办?

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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        瞌睡虫1号

        如题,用 RIPA 裂解细胞出了问题,在六孔板上加的裂解液,有一孔密度铺了 100% 还多,我加了150ul,裂解了 30min,期间有晃过六孔板,但发现流动的液体越来越少感觉都干了,结果收细胞只收到了50ul,另外几孔加的裂解液和回收量分别如下:120ul(50ul左右)、120ul(32ul)、80ul(75ul),100ul(75ul)、100ul(72ul),加裂解液量都是根据板上的细胞数来估计的,终浓度最低是 1.4,最高是 2.0,大神帮帮忙
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        2 个回答

        user-title

        zhangshm2005

        有帮助
        加完裂解液就用刮刀刮下来吸到EP管里再放置在冰上,不要先放置再刮,不然就容易干
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        comeon小钉子

        有帮助
        裂解液加过量了 细胞密度一致么?应该浓缩一下蛋白 再加裂解液
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