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        做 WB,一抗和 marker 怎样选取?

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

        user-title

        提拉米苏味

        我是新手,请前辈指教做WB :一抗和marker怎样选取???
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        7 个回答

        user-title

        elixiber

        有帮助
        一般选择的原则是去文献中找,看看别人做和你一样的目的蛋白的时候用的都是哪家得抗体,都有介绍的,看看图片效果怎么样。多找出一些文献,然后根据你掌握的信息选择一种最便宜,最高效,特异性最好的抗体。一般做科研的人都是这么选择抗体的,不能蒙着买,毕竟不便宜的。
        user-title

        xzmcjxj

        有帮助
        个人觉得一抗的话是abcam,cell signaling technology,santa cruz,bioworld这几家公司的不错 ,也比较常用,购买一抗的时候要注意它的试用范围,比如说使用的物种,主要就是H\M\R,指的是人、小鼠和大鼠,还有就是它适合做哪些实验,最常规的就是WB\IF\IMH等。而marker的话就是要根据自己的目的蛋白的大小来决定了,一般选接近的,如果分子量比较小的话就选择范围小一点的marker,这样最后条带分的比较开,便于裁胶,如果几个目的蛋白大小相差悬殊的话,就需要选择范围大一点的marker了。
        user-title

        D香园丁

        有帮助
        abcam,cellsignal,santa原装大都靠谱;国产三鹰的不错。
        user-title

        lysine21

        有帮助
        WB常用的抗体一般是由卖的,尤其是拟南芥、水稻等,还有就是自己克隆出目的蛋白,让公司定制;marker是根据目的条带的大小来选择,最好在条带附近的maker条带要密集一点,便于鉴定。
        user-title

        liangning1123

        有帮助
        根据你目的蛋白是人的还是动物的,从abcam网站上查询相应抗体货号,然后从国内试剂商那订购就行。
        user-title

        wangyx520

        有帮助
        一抗的选择 当然是看你实验需要撒。至于是哪家公司的,我们做的大部分是Santa Cruz,abcam,proteintech,还有就是国产生工的。
        user-title

        勇者无疆2011

        有帮助
        一抗要针对你的目的蛋白选择特异性很强的相应抗体就可以了的,一般选择抗体说明书上说专门针对WB使用的抗体,而且一般应选择效价较高的抗体。而MARKER则要取决于你的目的蛋白的分子大小了,选择相应的marker,marker最好要能比较容易的区分条带是否为目的蛋白,即在目的蛋白这一分子大小附近最好是能区分度较大,相应的分子大小的梯度要便于区分。
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