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Western blot的胶
土井挞克树
最好还是不要用过期的胶,效果不好
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问
求助关于p-s6蛋白跑WB的问题
bamboopiggy
S6 是mTOR下游的p70S6K的底物,你可以检查一下p70S6k有没有改变,有的时候,pS6对pAKT会有负反馈抑制,所以可能akt的改变不明显,而p-mTOR有不同的磷酸化位点,你查的那个可能正好没有变化,或者是因为mTOR有点大,你wb不好跑
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问
请问RAW细胞表达CD86吗
土井挞克树
RAW 264.7是可以表达CD86的
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问
想问一下为什么检测未知蛋白的时候要加标签呀?直接用需要检测蛋白的抗体孵不可以嘛?
balalaLy
看是什么标签,像GFP这类荧光标签就是为了方便观察
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问
想问问电泳80V,30分钟跑出浓缩胶,分离胶调低电压60V,90分钟跑分离胶,这样蛋白会弥散吗?
balalaLy
蛋白没那么容易弥散,停掉电泳放一个小时也还好,有持续的电流拉着蛋白跑就更不会弥散
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问
ELISA实验抗体的选择
土井挞克树
单克隆或多克隆抗体都可以用作夹心ELISA系统中的捕获和检测抗体
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问
ELISA实验检测类型
juyue2010
都可以做的,分泌型的检测上清就行,膜蛋白裂解提总蛋白后检测
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问
跑wb遇到了一些问题?
juyue2010
查询一下这种细胞常用内参,可能是你稀释比例有问题,或抗体失效
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问
为什么wb跑出条带所在位置与说明书的分子量大小不符?差别大,该怎么解决
土井挞克树
首先,SDS-PAGE电泳时分子量marker不能作为绝对标准,只是一个参考值。其次,有的蛋白(如组蛋白和一些易形成dimer的蛋白,还有一些比较难变性而又形成紧凑的球形结构的蛋白)在用常规方法电泳时会出现异常行为(表观分子量与实际分子量不符)
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问
一抗能放在-80度吗?干冰运输
balalaLy
干冰运输,购买的时候商家发货也是干冰运输的。储存还是看说明书的建议。
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问
wb电泳marker条带异常
申东熙老伯
是配胶的问题,胶的浓度问题,可以改变一下浓度,分离胶适当加大电压。
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问
Elisa
Dr_劉医生
没有,抗原和孔板结果本质就是蛋白质和板基质的疏水结合力,是非特异性的,根据蛋白质大小不一样可能有变化,但你的蛋白抗原也不可能变,唯一的话试一试微孔板,板基质状态不一样可能会增加结合力
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问
elisa怎么做
juyue2010
先做wb,先根据说明书进行稀释,效果不好的话,进行优化
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问
慢病毒基因组为什么可以装入其那么小的颗粒中?
土井挞克树
病毒是核酸,可以吸附在小颗粒中。
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问
elisa检测炎症因子
juyue2010
检测组织表达,肠腔属于体外了。
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问
请问Fr-iCLIP这个结果咋看,左边的数字是啥意思呢?
土井挞克树
左边的你可以看作是分组区间的。
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问
细胞转染,免疫共沉淀的相关问题?
juyue2010
若不是分泌蛋白,它会在细胞膜外,取细胞裂解液
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问
免疫磁珠和酶联免疫联用的相关问题?
土井挞克树
你说的问题可以通过改变Ph来解决。
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问
当分子A被敲低或敲除时,分子B可以替代分子A的作用,此时分子A和分子B是什么关系,替代关系吗?
juyue2010
不是替代,是补偿或代偿关系,生物中很常见。
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问
免疫共沉淀coip后wb分析的相关问题?
土井挞克树
要加的,孵育过后还是要加一抗。
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