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最近这段时间新配的running buffer稍微放半小时就变浑浊,放到瓶里就像流沙的感觉一样,是因为SDS变质了吗?
做生物的翔仔
建议检测配置用的水的pH值,我们曾经出现过类似的问题。但是我记不太清楚是要求碱性还是酸性了,你可以自己探索一下。
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问
条带拖尾是因为蛋白降解吗?
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问
pleb124等repA复制方式的质粒在D5Hα里可以构建扩增吗
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问
双荧光素酶检测海肾荧光值低!!!
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问
Coip琼脂糖珠法最后用2X上样缓冲液煮完蛋白以后,还需要再离心去掉beads,取上清吗,还是直接用有beads蛋白样跑WB呀
做生物的翔仔
去掉,否则在55/25左右会有杂蛋白出现。
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问
跨膜蛋白应该怎么诱导,正常的方法可以诱导出来吗?
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问
IL-2的体外诱生操作
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问
IL-2的体外诱生操作
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问
怎么查找抗体的同源性
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问
用lysis buffer提蛋白,加完loading之后变黄了,还有沉淀产生,煮沸之后变成了橙色,沉淀也变多了是为什么呀
做生物的翔仔
ph偏低,可以加入两到三微升碱溶液中和一下。
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问
WB有杂带是为什么?marker的位置都有?
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问
请问小鼠和人的血浆跑wb样品制备和后续实验是个什么流程 万分感谢
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问
求助:有做过a-synuclein PD大鼠脑组织的朋友么?
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问
CO-IP实验中Input组无条带,IgG组总是出现目的条带,请问如何解决
做生物的翔仔
需要确认目的条带是否出现在25和55附近,如果有的话推测可能是beads轻重链。排除方法是更换另一个种属的抗体,例如这次使用Flag R,可以选用Flag M的再次尝试。如果条带消失了表明确实是beads咋带。这样情况经常发生。当然也有可能是由于共沉淀是一个富集蛋白的过程,所以会适当的增加蛋白浓度。
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问
WB曝光后发现无目标条带,但内参条带比较好的原因有哪些
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问
BL21中诱导膜蛋白表达
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问
想请教各位大佬 条带是一团黑色咋回事啊 看不到清楚的目标条带 第二张图出现了多个条带是因为什么原因
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问
原核表达超声波破碎易起沫
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问
个别样本只显示目的蛋白,不显示内参,为什么?
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问
请问15KDa和42KDa蛋白转膜条件是多少?
做生物的翔仔
电流有点高了,150mA 1.5小时尝试一下。此外如果膜正面显影较浅,可以把膜反过来显影一次,如果反面比正面深,下次可以再继续减小电流。
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