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问
实验求助
土井挞克树
还是建议重新跑一遍wb和pcr,如果结果还是同样的那就要考虑实验设计的问题,一般来说pcr结果是比较准确的
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问
wb实验
magicmask
杂志社要求比较严,尽量不要调整
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问
做药物诱导细胞凋亡得实验,有没有可能小剂量药物阻滞G1期,大剂量药物阻滞S期,感谢
dxyc42u
很有可能的,有的药物本来会随剂量发生不同效果
2 回答
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问
AAV病毒用于细胞实验需要注意哪些问题?
sswei
AAV病毒用于细胞实验关键注意事项1. 启动子的选择。是选择广泛性启动子还是特异性启动子。相比于血清型的组织特异性,特异性启动子可实现细胞的特异性,因此对特异性要求较高的研究,可以选择某种细胞特异性表达的启动子。2. 血清型的选择。AAV的血清型主要由AAV衣壳蛋白的结构所决定,不同的衣壳蛋白结构识别不同的细胞表面受体,因此血清型的选择会影响AAV的感染效率、组织亲和性、和开始表达的时间。3. 病
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1243 围观
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问
为何有时病毒在体实验表达效率不理想?
sswei
可能的原因为目的细胞不易感,属于难感染细胞,建议适当加大病毒量再尝试。
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问
AAV病毒应该如何稀释保存?
dxyc42u
AAV病毒用培养液稀释后放四度保存,可以保存一周
3 回答
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问
AAV注射小鼠,多少病毒量才够呢?
huarenqiang5
根据注射部位的不同而剂量及血清型也不相同:1.肝脏:注射部位常选择门静脉、外周静脉和尾静脉。注射病毒滴度一般选择 8×10^10-2×10^12(GC/kg)(人、灵长类);1×10^11 GC/只鼠,稀释成 50-100 μl 进行尾静脉注射。2.心脏和动脉:常用血清型有:AAV1、AAV6、AAV8 和 AAV9 。常见的注射部位为冠状动脉、主动脉、心肌和尾静脉。注射病毒滴度为 1.9×10^
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问
用AAV可以实现组织特异性的感染吗?
dxyc42u
AAV一般很难实现组织特异性感染的
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问
哪些实验可以选择AAV病毒?
dxyc42u
一般对于一些难转染细胞的实验选择AAV病毒
3 回答
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问
AAV注射后如何检测目的基因过表达?
dxyc42u
检测目的基因表达一般选择qpcr或者wb实验
3 回答
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问
AAV可以通过哪些方法注射到动物体内进行感染?
sswei
AAV动物实验注射方式可分为系统性注射和原位注射两大类。系统性注射中AAV常见的注射方式有尾静脉注射、眶后静脉窦注射、腹腔注射、肌肉注射、面静脉注射、皮内注射等。原位注射也就是局部注射,根据实验需要在不同的部位进行注射,更加适合局部组织的研究。常见的注射方式有脑立体定位注射(神经)、玻璃体注射(眼睛)、心肌注射(心脏)、肝内注射丶肝门静脉注射等,局部注射的优点在于可实现靶组织的特异性感染,且所需的
4 回答
1132 围观
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问
AAV注射动物后多久可以观察病毒感染效果?
dxyc42u
看情况,有的七八天就看见效果了,有的半个月才能看见效果
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问
腺相关病毒产品的安全性如何?
dxyc42u
只要严格规范操作时很安全的。。
3 回答
457 围观
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问
腺相关病毒会整合到细胞基因组上吗?
dxyc42u
腺病毒就是整合到细胞基因组上的
3 回答
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问
腺病毒可以扩增,会不会比较危险?
dxyc42u
有一定的风险,所以操作时戴两层手套,不要打开通风厨
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问
腺病毒不够用?需要重新包毒吗?
huarenqiang5
这个建议重新进行包装比较可靠。
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411 围观
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问
慢病毒感染效率低是否可以二次感染呢?
dxyc42u
对于难转染细胞可以使用二次转染的
3 回答
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问
如何提高病毒对细胞的感染效率?
huarenqiang5
1.建议提前一天将细胞种植在24孔板中,以感染时细胞融合度在50%左右为宜。2.适当减少感染时的细胞培养基量可以增加感染效率,但也可能增加细胞毒性。如出现细胞毒性可增加培养基量或更换培养基。
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问
要曝光很长时间才能观察到荧光,原因是什么?
谦谦千千
可能是染的荧光比较弱,表达量低;也有可能是在染荧光后没有使用荧光淬灭剂,荧光淬灭了;还有可能是拍的时间太久,导致荧光淬灭。
4 回答
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问
为什么过表达病毒比对照的荧光要暗?
dxyc42u
考虑与病毒插入基因组位点不同导致的
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