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实验问答23,364,555 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

免疫

蛋白质

问采用elisa试剂盒检测胞内蛋白，蛋白样品该如何制备？

274 围观

问临床上HPV检测会使用免疫学方法吗？

292 围观

问马尾神经损伤模型WB，神经裂解液之前需要去除神经膜，请问各位大神有什么建议?

104 围观

问怎么验证内源性两蛋白相互作用

286 围观

问怎么验证两蛋白内源性相互作用啊

百泰派克-李工

验证两个蛋白之间的内源性相互作用可以通过多种生物化学和细胞生物学方法：1.免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation, Co-IP）:这是一种常用的方法，通过使用针对一个蛋白质的特异性抗体来捕获该蛋白质及其可能的相互作用伙伴。如果另一个蛋白质也被沉淀下来，这表明两者之间可能存在相互作用。图12.亲和素纯化质谱（Affinity Purification-Mass Spectromet

1 回答560 围观

问样品寄送过程,哪些需要低温?哪些需要干冰?哪些常温就可以?

百泰派克-李工

样品寄送的温度要求主要取决于样品的性质。下面是一些常见的样品类型及其相应的温度要求：1.生物样品（如血液、细胞、组织）：这些样品通常需要在低温下运输，以防止细胞活性的丧失或分解。它们通常需要干冰或者液氮来保持低温。2.化学试剂：某些化学试剂在常温下可能会分解或反应，因此需要低温保存。根据试剂的具体性质，可能需要干冰或冷藏。3.药品和疫苗：许多药品和疫苗对温度敏感，需要在冷藏（2-8°C）或冷冻条件

1 回答1066 围观

问WB配上样体系怎么配呀

百泰派克-李工

Western Blot（WB）实验中的上样体系（Loading Buffer 或 Sample Buffer）通常包含几个关键成分：制备和使用方法：将以上成分按比例混合。可以根据需要调整总体积。通常将上样体系与样品按一定比例混合（例如1:1或1:3），然后在沸水浴中加热5-10分钟进行变性。加热后让样品在室温冷却片刻，然后加载到SDS-PAGE凝胶槽中进行电泳。

1 回答444 围观

问请教，为什么我的PCDNA3.1空载体确定没有myc标签但是用myc标签抗体做WB能够打出来带子？

202 围观

问大佬们，放射免疫沉淀的结果怎么解读啊

273 围观

问WB怀疑一抗没敷上，显影完每条带，还能重新敷一抗吗？

546 围观

问为什么细胞培养弃上清液，WB取上清液啊

238 围观

问烟草双荧光素酶成像方法

456 围观

问sumo融合蛋白为什么在镍柱上柱上酶切切不掉标签？

百泰派克-李工

这种情况可能由几个因素引起：1.酶的活性不足：使用的酶可能活性不高，或者已经失活。酶的活性可以受到多种因素影响，包括储存条件、温度、pH值等。建议检查酶的质量和储存条件，或者尝试使用新鲜的酶。2.酶的浓度不足：可能酶的添加量不足，无法充分与蛋白接触或者达到足够的酶切效率。增加酶的浓度可能有助于改善切割效率。3.不适宜的酶切条件：酶的切割效率可能受到反应条件的影响，如pH值、盐浓度、温度等。需要优化

1 回答764 围观

问做实验经常失败，师兄师姐们是怎么调整心态。坚持下去的呢？

此用户已注销

我一般先把我的操作步骤和细节和师姐讲一下看看是不是自己哪里操作失误了没意识到。如果都没啥问题，那就会换一些试剂再试试。

1 回答436 围观

问肝脏蛋白GAPDH容易降解

405 围观

问目前有一条已知的多肽序列，想知道血清中他能结合的抗体信息，要通过什么方法确定呢？

203 围观

问请问跑Wb时，marker下半部分消失

107 围观

问用荧光酶标仪测细胞活性氧的荧光值一般是多少，怎样判断这个数值是否正常。贴壁细胞如果需消化下来，如何保证细胞消化完全，又不损害细胞。

276 围观

问ip 实验求助！input组目的蛋白为双条带，ip组拉下来是单条带！

百泰派克-李工

在免疫沉淀（Immunoprecipitation, IP）实验中，如果在input（输入）组中观察到目标蛋白为双条带，而在IP组中只拉下单条带，可能是由于：1、蛋白修饰：在Input组中，目的蛋白可能存在不同的翻译后修饰形式（如磷酸化、糖基化等），导致电泳迁移速度不同，形成双条带。而在IP组中，可能只有一种形式的蛋白被特异性抗体识别并沉淀下来。2、蛋白降解：在Input组中，双条带可能是由于蛋白

1 回答401 围观

问冷冻保存时间较长的样本还能进行elisa吗？

276 围观

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