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科研学霸天团，48小时有问必答

问现在想表达的蛋白所在载体带的是GFP,想把荧光蛋白换成CFP要怎么做啊？

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问请问怎么用高效液相识别水体中蓝绿藻的演替呀

百泰派克-李工

蓝绿藻演替主要是指不同种类蓝绿藻在水体中的优势地位随环境变化而发生的变化。使用HPLC进行此类研究的一般步骤如下：1.样品采集：2.样品处理：3.色谱分析：4.检测：5.数据分析：二、注意事项1.色素稳定性：2.色谱条件优化：3.标准品对照：4.重复性和准确性：

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问请问细胞养了怎么去做qPCR和WB?

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问怎么看慢病毒包装的效率如何?

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问MOI值受什么影响呢?

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问 Sephadex LH-20溶胀后脱气泡一般脱多长时间啊？

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问一抗孵育时间，4度过夜还是常温2小时？

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问采用elisa试剂盒检测胞内蛋白，蛋白样品该如何制备？

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问临床上HPV检测会使用免疫学方法吗？

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问马尾神经损伤模型WB，神经裂解液之前需要去除神经膜，请问各位大神有什么建议?

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问怎么验证内源性两蛋白相互作用

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问怎么验证两蛋白内源性相互作用啊

百泰派克-李工

验证两个蛋白之间的内源性相互作用可以通过多种生物化学和细胞生物学方法：1.免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation, Co-IP）:这是一种常用的方法，通过使用针对一个蛋白质的特异性抗体来捕获该蛋白质及其可能的相互作用伙伴。如果另一个蛋白质也被沉淀下来，这表明两者之间可能存在相互作用。图12.亲和素纯化质谱（Affinity Purification-Mass Spectromet

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问样品寄送过程,哪些需要低温?哪些需要干冰?哪些常温就可以?

百泰派克-李工

样品寄送的温度要求主要取决于样品的性质。下面是一些常见的样品类型及其相应的温度要求：1.生物样品（如血液、细胞、组织）：这些样品通常需要在低温下运输，以防止细胞活性的丧失或分解。它们通常需要干冰或者液氮来保持低温。2.化学试剂：某些化学试剂在常温下可能会分解或反应，因此需要低温保存。根据试剂的具体性质，可能需要干冰或冷藏。3.药品和疫苗：许多药品和疫苗对温度敏感，需要在冷藏（2-8°C）或冷冻条件

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问WB配上样体系怎么配呀

百泰派克-李工

Western Blot（WB）实验中的上样体系（Loading Buffer 或 Sample Buffer）通常包含几个关键成分：制备和使用方法：将以上成分按比例混合。可以根据需要调整总体积。通常将上样体系与样品按一定比例混合（例如1:1或1:3），然后在沸水浴中加热5-10分钟进行变性。加热后让样品在室温冷却片刻，然后加载到SDS-PAGE凝胶槽中进行电泳。

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问请教，为什么我的PCDNA3.1空载体确定没有myc标签但是用myc标签抗体做WB能够打出来带子？

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问大佬们，放射免疫沉淀的结果怎么解读啊

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问WB怀疑一抗没敷上，显影完每条带，还能重新敷一抗吗？

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问为什么细胞培养弃上清液，WB取上清液啊

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问烟草双荧光素酶成像方法

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问sumo融合蛋白为什么在镍柱上柱上酶切切不掉标签？

百泰派克-李工

这种情况可能由几个因素引起：1.酶的活性不足：使用的酶可能活性不高，或者已经失活。酶的活性可以受到多种因素影响，包括储存条件、温度、pH值等。建议检查酶的质量和储存条件，或者尝试使用新鲜的酶。2.酶的浓度不足：可能酶的添加量不足，无法充分与蛋白接触或者达到足够的酶切效率。增加酶的浓度可能有助于改善切割效率。3.不适宜的酶切条件：酶的切割效率可能受到反应条件的影响，如pH值、盐浓度、温度等。需要优化

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