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科研学霸天团，48小时有问必答

问转膜以后没封闭，pvdf膜存4℃冰箱前没晾干有啥后果？

百泰派克-李工

将PVDF膜（聚偏氟乙烯）转膜后直接放入4℃的冰箱而不进行晾干，可能会带来几个潜在的问题：1.水分残留：如果膜上有水分残留，低温条件可能导致水分凝结，这可能会影响膜的物理结构和性能。2.膜结构改变：PVDF膜在潮湿条件下可能发生结构上的改变，这可能会影响其后续的应用效果，如过滤或分离性能。3.微生物生长：虽然低温条件能抑制大多数微生物的生长，但长时间存放可能会促进耐寒微生物的生长，尤其是如果膜上有

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问做流式用贴壁细胞还是悬浮细胞染色，如何重悬

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问SDS-PAGE跑胶问题

努力自学的搬砖苗

胶的浓度和电泳液选择没问题的话，可以试试跑胶时加冰块。。跑胶温度太高也会弥散

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问SDS-PAGE跑胶问题

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问请问一下BCA测定总蛋白浓度时标准品各浓度需要设置几个孔呢？

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问考马斯亮蓝脱色为什么会一半透明一半还没洗干净（染色一小时，脱色过夜了），是染色过久了还是脱色时间不够，红色圈是一整块胶，求解答。

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问western blot

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问蛋白溶解性差可以考虑哪些方法来改进

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问脱细胞鱼皮基质制备时，真皮应该保留多厚才好

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问请问SDS-PAGE电泳，蛋白条带跑成这样是什么原因？

莫恨香消玉减

也有可能样品中有沉淀，离心后取上清，梯度上样

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问请问最右边蛋白条带成那样是什么原因啊？

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问wb下层胶问题，这是为什么？哪一步操作有问题？要怎么注意？各位大神帮忙看看。。。

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问做WB时，小kd的条带跑出来是倒u型弯曲，稍大些kd的是正常的，为什么呢，是胶没配好，还是电泳夹子是漏的？

百泰派克-李工

在蛋白质凝胶电泳（Western Blot, WB）中，如果小分子量（小kd）的蛋白条带出现倒U型弯曲，而较大分子量（大kd）的蛋白则正常，这可能是由几个因素引起的：1.凝胶问题：如果凝胶制备不均匀或者在聚合过程中发生了问题，可能会导致蛋白质在电泳过程中不均匀迁移。比如，凝胶中的交联密度不均匀可能会导致小分子量蛋白质在电泳过程中发生变形。2.样品过载：如果样品量太多，尤其是小分子量的蛋白质，可能会

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问请问免疫共沉淀Co-IP后能够做定量比较吗？

百泰派克-李工

免疫共沉淀（Co-IP）实验后通常不适合直接用于定量比较，因为此技术主要用于检测蛋白质间的相互作用，而不是蛋白质的表达量。Co-IP更多地被视为一种定性方法，用于确认蛋白质之间是否存在相互作用。如果需要进行定量比较，可以考虑使用免疫印迹（Western Blot）等其他方法来补充Co-IP实验的结果。免疫印迹能提供更精确的蛋白质定量信息。然而，即使使用这些方法，也需要注意样本处理、蛋白质载量和检测

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问有无大佬指教下目的蛋白和内参一样齐，怎么调整，上样量已经从4U降到1u了，都这样，免疫组化有趋势，蛋白浓度5u/GUl

dxy_9z1hjq54

我也不知道答案，求大神给我答案

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问人的抗体什么情况下可以给鼠用

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问WB做炎症通路趋势重复不出来怎么办？是什么原因呢？

237 围观

问20mM的硝酸银溶液怎么配置

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问怎么样配制标准20mM硝酸银溶液？

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问WB出现异常大的条带

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