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实验问答23,362,043 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

免疫

蛋白质

问请问一下BCA测定总蛋白浓度时标准品各浓度需要设置几个孔呢？

258 围观

问考马斯亮蓝脱色为什么会一半透明一半还没洗干净（染色一小时，脱色过夜了），是染色过久了还是脱色时间不够，红色圈是一整块胶，求解答。

455 围观

问western blot

287 围观

问蛋白溶解性差可以考虑哪些方法来改进

269 围观

问脱细胞鱼皮基质制备时，真皮应该保留多厚才好

222 围观

问请问SDS-PAGE电泳，蛋白条带跑成这样是什么原因？

莫恨香消玉减

也有可能样品中有沉淀，离心后取上清，梯度上样

2 回答629 围观

问请问最右边蛋白条带成那样是什么原因啊？

329 围观

问wb下层胶问题，这是为什么？哪一步操作有问题？要怎么注意？各位大神帮忙看看。。。

240 围观

问做WB时，小kd的条带跑出来是倒u型弯曲，稍大些kd的是正常的，为什么呢，是胶没配好，还是电泳夹子是漏的？

百泰派克-李工

在蛋白质凝胶电泳（Western Blot, WB）中，如果小分子量（小kd）的蛋白条带出现倒U型弯曲，而较大分子量（大kd）的蛋白则正常，这可能是由几个因素引起的：1.凝胶问题：如果凝胶制备不均匀或者在聚合过程中发生了问题，可能会导致蛋白质在电泳过程中不均匀迁移。比如，凝胶中的交联密度不均匀可能会导致小分子量蛋白质在电泳过程中发生变形。2.样品过载：如果样品量太多，尤其是小分子量的蛋白质，可能会

1 回答351 围观

问请问免疫共沉淀Co-IP后能够做定量比较吗？

百泰派克-李工

免疫共沉淀（Co-IP）实验后通常不适合直接用于定量比较，因为此技术主要用于检测蛋白质间的相互作用，而不是蛋白质的表达量。Co-IP更多地被视为一种定性方法，用于确认蛋白质之间是否存在相互作用。如果需要进行定量比较，可以考虑使用免疫印迹（Western Blot）等其他方法来补充Co-IP实验的结果。免疫印迹能提供更精确的蛋白质定量信息。然而，即使使用这些方法，也需要注意样本处理、蛋白质载量和检测

1 回答912 围观

问有无大佬指教下目的蛋白和内参一样齐，怎么调整，上样量已经从4U降到1u了，都这样，免疫组化有趋势，蛋白浓度5u/GUl

dxy_9z1hjq54

我也不知道答案，求大神给我答案

1 回答158 围观

问人的抗体什么情况下可以给鼠用

339 围观

问WB做炎症通路趋势重复不出来怎么办？是什么原因呢？

280 围观

问20mM的硝酸银溶液怎么配置

232 围观

问怎么样配制标准20mM硝酸银溶液？

236 围观

问WB出现异常大的条带

268 围观

问wb 实验出现“波浪”条带

556 围观

问求问WB 的目的蛋白分子量160kDa，转膜条件怎么设定

百泰派克-李工

在进行Western Blot（WB）分析时，如果目标蛋白的分子量为160 kDa，转膜条件应该注意以下几点：1.膜材料：对于大分子蛋白（如160 kDa），通常推荐使用PVDF（聚偏氟乙烯）膜，因为它具有更高的蛋白结合能力。2.转膜缓冲液：使用含有适量甲醇的转膜缓冲液。甲醇有助于蛋白质更好地结合到PVDF膜上，但过多的甲醇可能会导致蛋白质过度聚集，影响转移效果。通常，缓冲液中甲醇的比例为10-2

2 回答518 围观

问如何验证两蛋白结合水平发生改变？

196 围观

问WB相同来源的一抗可以同时孵育吗

351 围观

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